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RICKETTSIOSI ed EHRLICHIOSI EZIOLOGIA e DIAGNOSI DI LABORATORIO Dott.ssa Valentina Ebani Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti Facoltà

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Presentazione sul tema: "RICKETTSIOSI ed EHRLICHIOSI EZIOLOGIA e DIAGNOSI DI LABORATORIO Dott.ssa Valentina Ebani Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti Facoltà"— Transcript della presentazione:

1 RICKETTSIOSI ed EHRLICHIOSI EZIOLOGIA e DIAGNOSI DI LABORATORIO Dott.ssa Valentina Ebani Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti Facoltà di Medicina Veterinaria Università di Pisa

2 EZIOLOGIA BATTERI Gram negativiGiemsa Gimenez Pleomorficoccoidi/elissoidali Parassiti intracellulari obbligati liberi nel citoplasma in vacuoli intracitoplasmatici (Rickettsie) (Ehrlichie)

3 TRASMISSIONE TRAMITE VETTORI INVERTEBRATI ZECCHE CELLULE BERSAGLIO CELLULE EMATOPOIETICHECELLULE MATURE O IMMATUREENDOTELIALI EhrlichieRickettsie

4 PRECEDENTE CLASSIFICAZIONE ORDINE RICKETTSIALES Famiglia RICKETTSIACEAE Tribù Rickettsieae Genere Rickettsia Tribù Ehrlichieae Genere Ehrlichia Generi Coxiella Cowdria Neorickettsia Famiglia ANAPLASMATACEAE Generi Anaplasma Aegyptianella Haemobartonella Eperythrozoon Famiglia BARTONELLACEAE Genere Bartonella

5 STUDI GENOMICI SU Gene 16S rRNA Gene groESL Geni che codificano per proteine di membrana

6 ATTUALE CLASSIFICAZIONE ORDINE RICKETTSIALES Famiglia RICKETTSIACEAE Genere Rickettsia Genere Orientia Famiglia ANAPLASMATACEAE Genere Anaplasma GenereEhrlichia GenereNeorickettsia Genere Wolbachia Genere Cowdria

7 FAMIGLIA RICKETTSIACEAE Rickettsia Orientia tsutsugamushi TYPHUS GROUP R. prowatzekii R. typhi R. canadensis R. rickettsii R. conorii R. felis R. helvetica R. akari R. sibirica SPOTTED FEVER GROUP

8 entrata moltiplicazionerilascio

9 Rickettsia rickettsii FEBBRE DELLE MONTAGNE ROCCIOSE ROCKY MOUNTAIN SPOTTED FEVER (RMSF) Ixodes ricinus

10 Rickettsia rickettsii

11 Rickettsia conorii FEBBRE BOTTONOSA DEL MEDITERRANEO Rhipicephalus sanguineus

12 Rickettsia felis Rickettsia typhi CANE GATTO Ctenocephalides felis !?

13 FAMIGLIA ANAPLASMATACEAE Anaplasma Ehrlichia Neorickettsia A. phagocytophila A. platys A. marginale A. bovis E. canis E. chaffeensis E. ewingii E. muris E. ruminantium N. risticii N. sennetsu N. helminthoeca

14 entrata moltiplicazione rilascio

15 Ehrlichia canis EHRLICHIOSI MONOCITICA PANLEUCOPENIA TROPICALE CANINA Rhipicephalus sanguineus MONOCITI

16 Ehrlichia chaffeensis EHRLICHIOSI MONOCITICA MONOCITI Ehrlichia ewingii EHRLICHIOSI GRANULOCITICA GRANULOCITI

17 Anaplasma phagocytophila EHRLICHIOSI GRANULOCITICA Ixodes ricinus

18 Neorickettsia risticii EHRLICHIA MONOCITICA POTOMAC HORSE FEVER MONOCITI

19 DIAGNOSI DI LABORATORIO

20 DIAGNOSI INDIRETTA Immunofluorescenza indiretta gold standard Soglia di positività 1:40 Ehrlichie 1:64 Rickettsie SIERO

21 VANTAGGI: Vetrini IFI per E.canis A. phagocytophila N. risticii R. conorii R. rickettsii R. typhi R. prowazekii SVANTAGGI: Attrezzatura Lettura Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti - Pisa

22 ALTRI TEST SIEROLOGICI KIT COMMERCIALI Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) ANTIGENI whole cell Proteine ricombinanti (p30 p30-1) Proteina ricombinante (rMAP2) E. canis

23 SENSIBILITA KIT Ridotta con titoli anticorpali 1:40 – 1:80 CANI CON EHRLICHIOSI IN FASE NON ACUTA HANNO TITOLI ANTICORPALI BASSI

24 PROBLEMA CROSS-REAZIONI NON CONFONDERE LE CROSS-REAZIONI CON LE CO-INFEZIONI Frequenti le co-infezioni legate allo stesso vettore E. canis / R. conorii A. phagocytophila / R. rickettsii

25 DIAGNOSI DIRETTA Ehrlichiosi STRISCIO buffy coat sangue da vasi capillari aspirato tissutale da milza, polmone, linfonodi (E. canis)

26 ISOLAMENTO difficoltà di esecuzione linee cellulari diverse laboratorio di classe 3 (eccetto E. canis) Su stipite isolato sono possibili studi spr di ordine epidemiologico

27 DIAGNOSI MOLECOLARE Sangue in EDTA buffy coat Tessuti Estrazione DNA Polymerase chain reaction (PCR) Utilizzo di primer diversi a seconda dellagente eziologico ricercato

28 E. canis E. chaffeensis A. phagocytophila N. risticii Rickettsia spp. sequenziamento Presso Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti, Università di Pisa

29 CONCLUSIONI Diversi agenti responsabili di ehrlichiosi e rickettsiosi nel CANE Sierologia mediante IFI Ausilio offerto da metodiche molecolari


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