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Proteina intatta 1 2 3 4 Ala-Leu-Thr-Pro............ Endoproteinasi Arg-C 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 a) Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg.

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3 Proteina intatta Ala-Leu-Thr-Pro Endoproteinasi Arg-C a) Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg b) Ser-Thr-Val c) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu-Met-Val-Arg Endoproteinasi Glu-C d) Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg-Ser-Thr-Val e) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu f) Met-Val-Arg-Ile-Lys-Val-Trp-Glu Allineamento per sovrapposizione zone comuni: e) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu c) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu-Met-Val-Arg f) Met-Val-Arg-Ile-Lys-Val-Trp-Glu a) Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg d) Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg-Ser-Thr-Val b) Ser-Thr-Val Sequenza: Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu-Met-Val-Arg-Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg-Ser-Thr-Val ____________________________ ___________ ____________________ ___________________________ ___________

4 AnnoQuantita'Tempo 196O 10 g3 anni g1 anno mg1 settimana mg1 giorno mg1 giorno Quantita' e tempi richiesti negli anni per sequenziare un peptide di 50 residui amminoacidici

5 -Sequenziatore automatico di peptidi Applied Biosystem Procise 492 che opera secondo il metodo di Edman della degradazione con fenilisotiocianato

6 Schema di un sequenziatore di peptidi

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12 Spettrometro di massa

13 Standard PTH-a.acidi Degradazione di Edman

14 Primo passo degradazione Edman Peptide singolo

15 Secondo passo degradazione Edman Peptide singolo

16 Degradazione di Edman su miscela di peptidi Tre passi

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