Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

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6 L’RNA polimerasi di E. coli

7 Le RNA polimerasi batteriche hanno quattro tipi di subunità
a2bb’s

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10 Inibitore Enzima bersaglio Azione dell'inibitore Rifamicina Streptolidigina Actinomicina D a -Amanitina oloenzima proc. nucleo enz. proc. pol I eucariotica pol II eucariotica lega b e inibisce inizio e inibisce allungamento lega il DNA e inibisce allungamento lega la RNA polimerasi II

11 La trascrizione può essere divisa in quattro stadi:
Riconoscimento Inizio Allungamento Terminazione

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19 I promotori procariotici

20 l l Identificazione della “Pribnow box” presente nella
maggiorparte dei promotori di E.coli fd ..TGCTTCTGACTATAATAGACAGGGTAAAGACCTGATTTTTGA T7 A3 AAGTAAACACGGTACGATGTACCACATGAAACGACAGTGAGTCA T7 A2 AGTAACATGCAGTAAGATACAAATCGCTAGGTAACACTAGCAG. Lac-UV- 5 GCTTCCGGCTCGTATAATGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAA. l P ACCTCTGGCGGTGATAATGGTTGCATGTACTAAGGAGGTTG... R l P ACCACTGGCGGTGATACTGAGCACATCAGCAGGACGCACTGAC. L Tyr tRNA ..CGTCATTTGATATGATGCGCCCCGCTTCCCGATAAGGGAGCA  Lac w.t. GCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAA. 5-9 bp Consens o T80A95T45A60A50T96 A/G

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24 Un tipico promotore di E.coli è costituito da tre componenti:
le sequenze consenso -35 e -10, e il sito d’inizio TATAAT TTGACA 5-9 basi 16-19 basi -10 -35 Sequenza -35 Pribnow box Sito di inizio della trascrizione +1

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