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RICERCA DI INIBENTI NEL LATTE VACCINO 6°Ring Test Specialistico Novembre 2009 Continanza R.,Castellano L. 10° Meeting AIA-LSL Montegrotto Terme (PD) Associazione.

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1 RICERCA DI INIBENTI NEL LATTE VACCINO 6°Ring Test Specialistico Novembre 2009 Continanza R.,Castellano L. 10° Meeting AIA-LSL Montegrotto Terme (PD) Associazione Italiana Allevatori Laboratorio Standard Latte

2 Ricerca degli inibenti nel latte 2000Il Laboratorio Standard Latte inizia a produrre campioni di Latte Vaccino Liofilizzato contenenti ANTIBIOTICI inseriti nel Ring Test Routine NOVEMBRE 2002 Il LSL organizza il 1° RING TEST SPECIALISTICO per la ricerca degli Inibenti nel latte vaccino MAGGIO 20032° RING TEST SPECIALISTICO SETTEMBRE 20043° RING TEST SPECIALISTICO GIUGNO 20054° RING TEST SPECIALISTICO MAGGIO 20075° RING TEST SPECIALISTICO NOVEMBRE 20096° RING TEST SPECIALISTICO Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

3 Perché partecipare ? Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL Valutare le performance analitiche dei singoli partecipanti in un contesto più ampio sia di campioni, sia di antibiotici. Confrontare le performance di diversi kit disponibili in commercio per la ricerca di inibenti nel latte. RT Specialistico Laboratori Valutare le performance analitiche dei propri prodotti in un ampio contesto di operatori del settore. Produttori

4 Organizzazione del Ring Test Progettazione Progettazione Invito ai clienti Invito ai clienti Raccolta delle adesioni Raccolta delle adesioni Allestimento Allestimento Elaborazione dati Elaborazione dati Comunicazione risultati ai partecipanti Comunicazione risultati ai partecipanti Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

5 6° RT Specialistico Nellambito della nostra abituale programmazione dei RT Specialistici la ditta Charm Sciences,Inc si è resa disponibile a fornire gratuitamente ai Laboratori partecipanti un loro kit di nuova produzione. LSL essendo un organizzazioneSuper Partes ha informato dellevento le altre ditte produttrici di kit analoghi invitandole a mettere a disposizione i loro prodotti. Ha aderito allinvito,nei tempi prestabiliti, solo la ditta DSM. Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

6 Progettazione-scelta degli Inibenti - LATTAMICIAmoxicillin - LATTAMICIAmoxicillinCeftiofur SULFAMIDICISulfadiazine TETRACICLINEOxytetracycline AMINOGLICOSIDINeomycin Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

7 Progettazione del Ring Test MOLECOLE UTILIZZATE : 5 diversi Antibiotici CAMPIONI DI LATTE : 6 campioni di latte vaccino KIT : - Cow Side II Test - Charm Sciences,Inc (inviato da LSL) - Delvotest SP 5 Pack-NT – DSM (inviato da LSL) - kit in uso presso i singoli partecipanti Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

8 Progettazione-campioni Preparazione di 5 campioni con concentrazione di antibiotico prossimo al MRL Preparazione di 5 campioni con concentrazione di antibiotico prossimo al MRL Preparazione di 1 campione di controllo con una concentrazione di antibiotico circa 10 MRL Preparazione di 1 campione di controllo con una concentrazione di antibiotico circa 10 MRL Diversamente dai precedenti non è stato inserito nel set di campioni del RT un campione NEGATIVO Diversamente dai precedenti non è stato inserito nel set di campioni del RT un campione NEGATIVO

9 Preparazione dei campioni Latte scremato UHT addizionato con quantità note di antibiotico tali da raggiungere i rispettivi livelli MRL (Limite di Residuo Massimo) Latte scremato UHT addizionato con quantità note di antibiotico tali da raggiungere i rispettivi livelli MRL (Limite di Residuo Massimo) Amoxicillin MRL 4 ppb CeftiofurMRL 100 ppb CeftiofurMRL 100 ppb SulfadiazineMRL 100 ppb SulfadiazineMRL 100 ppb OxytetracyclineMRL 100 ppb OxytetracyclineMRL 100 ppb NeomycinMRL 500 ppb NeomycinMRL 500 ppb Campione di controllo Positivo ( lattamico ~10 MRL) Campione di controllo Positivo ( lattamico ~10 MRL) Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

10 Distribuzione di 5 ml di latte in provette da 10 ml Distribuzione di 5 ml di latte in provette da 10 ml Prove di omogeneità del campione (10%) Prove di omogeneità del campione (10%) Liofilizzazione Liofilizzazione Test di conformità del prodotto finito Test di conformità del prodotto finito Test finale di stabilità 27/11/2009 Test finale di stabilità 27/11/2009 Preparazione dei campioni Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL CAMPIONECHARM COW SIDE II TESTDELVOTEST SP5 PACK-NT SULFADIAZINA ++ AMOXICILLINA ++ OXITETRACICLINA +- NEOMICIN ++ CEFTIOFUR ++ BETA LATTAMICO ++

11 Spedizione campioni e Raccolta dati Protocollo operativo Protocollo operativo Materiali: Materiali: Campioni Di Latte Liofilizzato; 1 Kit Charm Cow Side Ii Con Relative Istruzioni; 1 Kit Delvotest Sp5 Pack-nt Con Relative Istruzioni. Modalita Operative: Modalita Operative: Ricostituire Tutti I Campioni Con 4,5 G ± 0,1 G Di Acqua Deionizzata Agitando Vigorosamente Fino A Completa Dispersione Del Liofilizzato. Ricostituire Tutti I Campioni Con 4,5 G ± 0,1 G Di Acqua Deionizzata Agitando Vigorosamente Fino A Completa Dispersione Del Liofilizzato. Eseguire Le Analisi Utilizzando I Due Kit Da Noi Forniti Oltre Al Kit Normalmente Usato Nel Proprio Laboratorio. Eseguire Le Analisi Utilizzando I Due Kit Da Noi Forniti Oltre Al Kit Normalmente Usato Nel Proprio Laboratorio. Riportare I Risultati Nella Tabella Allegata Ed Inviarli Al Laboratorio Standard Latte Tramite Fax Entro Il Giorno Riportare I Risultati Nella Tabella Allegata Ed Inviarli Al Laboratorio Standard Latte Tramite Fax Entro Il Giorno I Campioni Vanno Conservati A 4°c ± 2 °C Fino Al Momento Delluso. I Campioni Vanno Conservati A 4°c ± 2 °C Fino Al Momento Delluso. ESPRIMERE I RISULTATI UTILIZZANDO LA SEGUENTE LEGENDA: + = POSITIVO - = NEGATIVO +/- = DUBBIO, PREVALENTE POSITIVO -/+ = DUBBIO, PREVALANTE NEGATIVO + = POSITIVO - = NEGATIVO +/- = DUBBIO, PREVALENTE POSITIVO -/+ = DUBBIO, PREVALANTE NEGATIVO Assemblaggio dei campioni e dei 2 kit e spedizione il 17 Novembre 2009 Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL CampioniCHARM COW SIDE IIDELVO TEST SP5 PACK-NTMETODO IN USO

12 Laboratori partecipanti LABORATORI PARTECIPANTI n° 70 RISULTATI AL 30 novembre 2009 n° 62 Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

13 Risultati Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL A = CHARM B = DELVO SP5 PACK-NT C = KIT IN USO (45 LAB. - DELVOTEST ; 7 LAB. - COPAN TEST ; 5 LAB - ECLIPSE)

14 Risultati Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL AmoxicillinaCeftiofurCtrl + A - Cow Side II B - Delvotest C - Metodo in uso

15 Risultati Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL SulfadiazinaOxitetraciclinaNeomicina A - Cow Side II B - Delvotest C - Metodo in uso

16 Considerazioni finali Lanalisi approfondita dei risultati sarà effettuata dopo la completa elaborazione dei risultati e la preparazione e invio del Report. Dalla lettura dei moduli contenenti i risultati si si può ipotizzare che in alcuni laboratori non ci sia un uso sistematico, ad ogni sessione di lavoro, dei campioni di controllo POSITIVO e NEGATIVO. Lassenza del campione sicuramente negativo, contrariamente a quanto atteso dai laboratori, ha aumentato la percentuale di risultati errati rispetto ai precedenti RT specialistici. Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL

17 GRAZIE PER LA VOSTRA ATTENZIONE Ricerca Inibenti nel latte vaccino 10° Meeting AIA-LSL


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