PrOgEtTo REpLAY PROGETTO IN SINTESI Bersani Fabrizio

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Transcript della presentazione:

PrOgEtTo REpLAY PROGETTO IN SINTESI Bersani Fabrizio De Cristofaro Luca Di Lena Simone Frigerio Stefano Girotto Alessandro Maiorana Antonina Pecoraro Veronica PROGETTO IN SINTESI

PRIMA FASE: trasformazione batterica PUNTO DI PARTENZA Aliquota di cellule competenti.

PRIMA FASE: trasformazione batterica SCOPO Trasformare le cellule batteriche inserendo il DNA plasmidico che contiene il gene per la resistenza all’Ampicillina (AMP)

PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICA RISULTATI: Le cellule trasformate, piastrate su terreno con antibiotico, svilupperanno delle colonie   .

PREPARAZIONE DI COLTURE LIQUIDE Passaggio intermedio tra 1° e 2° fase: Vengono preparate colture liquide di batteri trasformati, a partire da colonie cresciute su terreno solido.

SECONDA FASE: minipreps di dna PUNTO DI PARTENZA Colture liquide in terreno selettivo (AMP)

SECONDA FASE: minipreps di dna SCOPO Estrarre il DNA plasmidico da un’aliquota della soluzione di partenza

SECONDA FASE: minipreps di dna RISULTATI Soluzione di DNA plasmidico in eppendorf

TERZA FASE: elettroforesi PUNTO DI PARTENZA Aliquota di DNA plasmidico appena estratto Caricamento dei campioni su gel d’agarosio Corsa elettroforetica.

TERZA FASE: elettroforesi SCOPO Verificare l’avvenuta trasformazione delle cellule batteriche dal punto di vista molecolare.

TERZA FASE: elettroforesi RISULTATI Dopo la corsa su gel d’agarosio, con l’ausilio del colorante, si evidenziano le bande di DNA plasmidico.