PrOgEtTo REpLAY PROGETTO IN SINTESI Bersani Fabrizio De Cristofaro Luca Di Lena Simone Frigerio Stefano Girotto Alessandro Maiorana Antonina Pecoraro Veronica PROGETTO IN SINTESI
PRIMA FASE: trasformazione batterica PUNTO DI PARTENZA Aliquota di cellule competenti.
PRIMA FASE: trasformazione batterica SCOPO Trasformare le cellule batteriche inserendo il DNA plasmidico che contiene il gene per la resistenza all’Ampicillina (AMP)
PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICA RISULTATI: Le cellule trasformate, piastrate su terreno con antibiotico, svilupperanno delle colonie .
PREPARAZIONE DI COLTURE LIQUIDE Passaggio intermedio tra 1° e 2° fase: Vengono preparate colture liquide di batteri trasformati, a partire da colonie cresciute su terreno solido.
SECONDA FASE: minipreps di dna PUNTO DI PARTENZA Colture liquide in terreno selettivo (AMP)
SECONDA FASE: minipreps di dna SCOPO Estrarre il DNA plasmidico da un’aliquota della soluzione di partenza
SECONDA FASE: minipreps di dna RISULTATI Soluzione di DNA plasmidico in eppendorf
TERZA FASE: elettroforesi PUNTO DI PARTENZA Aliquota di DNA plasmidico appena estratto Caricamento dei campioni su gel d’agarosio Corsa elettroforetica.
TERZA FASE: elettroforesi SCOPO Verificare l’avvenuta trasformazione delle cellule batteriche dal punto di vista molecolare.
TERZA FASE: elettroforesi RISULTATI Dopo la corsa su gel d’agarosio, con l’ausilio del colorante, si evidenziano le bande di DNA plasmidico.