Cenni di Microscopia

Potere risolutivo Potere risolutivo: capacità di vedere due punti come distinti tra loro Potere risolutivo dell’occhio umano: circa 1/10 di millimetro Per poter risolvere (individuare come distinti) oggetti di dimensiori inferiori al potere risolutivo dell’occhio umano sono state prima lenti d’ingrandimento e poi microscopi. Il primo microscopio fu realizzato nel ‘600 e consentì la comprensione che ogni essere vivente è costituito da cellule.

Microscopio ottico Dotato di due sistemi di lenti (obiettivo e oculare) Consente di ingrandire la immagine di un oggetto di 2000 volte. Potere risolutivo: 0,2 micron (mm) ovvero 200 nanometri Oggetti più piccoli osservabili: batteri, caratterizzati da dimensioni attorno ai 2mm

microfotografia di batteri colorati con arancio di acridina Immagini al microscopio ottico microfotografia di tessuto vegetale microfotografia di batteri colorati con arancio di acridina

Microscopio elettronico a scansione (SEM) Un fascio di elettroni primari, opportunamente focalizzato da lenti elettroniche, colpisce la superficie del campione (disidratato e reso conduttivo) generando elettroni secondari retrodiffusi e raccolti (rivelatore) durante la scansione del campione. La quantità ed energia degli elettroni secondari retrodiffusi da ogni punto del campione dipende dalla morfologia e dalla chimica del campione in quel punto. Potere risolutivo: inferiore a quello del m. elettronico a trasmissione Oggetti più piccoli osservabili: Superfici di oggetti e cellule (es: ciglia cellulari)

Immagini al microscopio elettronico a scansione (SEM) Sezione di piccola arteria con globuli rossi Arto insetto Il pelo di un braccio

Microscopio elettronico a trasmissione (TEM) Un fascio di elettroni, dopo aver attraversato l’oggetto da ingrandire (molto sottile e opportunamente trattato), colpisce uno schermo fluorescente sul quale si forma l’immagine. Potere risolutivo: 0,2 nanometri (nm) ovvero 2 angstrom Oggetti più piccoli osservabili: Struttura fine di strutture cellulari (es: due strati della membrana cellulare)

Immagini al microscopio elettronico a trasmissione (TEM) microfotografia di parvovirus microfotografia di molecole circolari di DNA