Morfologia sferoidale INVOLUCRO glicoproteine SU e TM Morfologia sferoidale (approx. 100 nm) Capside icosaedrico o a forma tronco-conica Genoma diploide RNAss a polarita’ positiva (9-10 Kb) HIV RETROVIRUS gag pol env RNA genomico cap polyA

RETROVIRIDAE vertebrati alterazioni tumori del sistema immunitario patologie neurodegenerative alterazioni del sistema immunitario Alpha- Beta- Gamma- Epsilon- retrovirus leucemie Delta- Lentivirus

HIV penetrazione HIV-1 HIV-2 gp120 /NCp7 gp41 p17 MA p24 CA integrasi proteina di matrice p17 MA HIV integrasi proteasi proteina nucleocasidica p9 NC penetrazione HIV-1 HIV-2 /NCp7

COMPLESSO DI PREINTEGRAZIONE Trascrittasi Inversa : RT RETROTRASCRIZIONE RT manca di attività “proof reading” 1-10 errori/genoma RT: DNA polimerasi RNA-dipendente RT: RNAsi H RT: DNA polimerasi DNA-dipendente

DNA PROVIRALE U3 R LTR

INTEGRAZIONE del DNA PROVIRALE PROCESSAMENTO: le estremità del DNA virale vengono riconosciute da IN e tagliate per formare idonee estremità 3’ (avviene nel PIC). INTEGRAZIONE: rottura dei legami fosfodiesterici nel DNA dell’ospite (4-6 bp) Inserimento delle estremità 3’virali (processate) Enzimi di riparo (della cellula ospite) L’integrazione è sito specifica per il genoma virale (estremità), ma casuale nel genoma della cellula ospite

Espressione del provirus PROVIRUS INTEGRATO PROMOTORE RNA polimerasi II cellulare PolyA Espressione del provirus Trascritti corti proteina TAT ATTIVA TRASCRIZIONE DI HIV-1

TRASCRIZIONE HIV-1

Gag-pol e env mRNA sono tradotti come poliproteine processate 9.1 kb 4.3 kb Gag-pol e env mRNA sono tradotti come poliproteine processate successivamente SU gp120 gp160 TM gp41 RT p51/66 IN p31 PR p10 MA NC CA pr55 p2 NC p7 p1 p6 p17 p24 p15

Ciclo di replicazione di HIV-1 TRASCRIZIONE di mRNA e vRNA SINTESI PRECURSORI PROTEICI ASSEMBLAGGIO sulla plasmamembrana MATURAZIONE attività della PROTEASI

Farmaci anti-HIV-1 a b c Enfuvirtide (T20) inibitori nucleosidici (AZT) inibitori nucleotidici (Tenofovir) inibitori non-nucleosidici (Nevirapina, Efavirenz) molecole peptidomimetiche in grado di bloccare il sito catalitico della proteasi (Ritonavir) c Farmaci anti-HIV-1

VIRUS a RNAss di POLARITA’ NEGATIVA il genoma virale non può essere tradotto l’RNA virale è trascritto in mRNA (polarità+) RNA virale non è infettante I virioni contengono una RNA polimerasi RNA-dipendente virus provvisti di involucro ORDINE MONONEGAVIRALES

trascrittasi e replicasi virale PARAMYXOVIRIDAE 150-300 nm morfologia: sferico pleomorfica (forme filamentose) adsorbimento penetrazione HN G F M RpRd trascrittasi e replicasi virale P + L NP

GENOMA PARAMYXOVIRIDAE Tr GENOMA PARAMYXOVIRIDAE sequenze intergeniche EIS

sequenze intergeniche EIS TRASCRIZIONE dei PARAMYXOVIRUS Pol (P+L) inizia la sintesi del mRNA al terminale 3’ trascrizione della sequenza Leader la Pol si ferma alla sequenza STOP la trascrizione ricomincia al 3’ (sequenza START) del gene N la trascrizione di N continua fino alla sequenza STOP Pol ricomincia la sintesi al 3’ del gene P L: RpRd P: recruta L sul templato. TRASCRIZIONE dei PARAMYXOVIRUS mRNA monocistronici Modello “Start-Stop

ruolo delle sequenze EIS mRNA provvisti di “ cap” e “poly A” ruolo delle sequenze EIS SEQUENZE STOP per scivolamento viene sintetizzata la coda poliA (200nt) all’estremità 3’ del trascritto Terminazione del trascritto SEQUENZE START 5’ “capping” del mRNA

End-Intermediate-Start F HN L 3’ 5’ Trascrizione polarizzata P Sequenze EIS End-Intermediate-Start

Transizione tra trascrizione e replicazione del genoma dei PARAMYXOVIRUS bassi livelli di N: favoriscono la sintesi di mRNA alti livelli di N: la RpRd continua la sintesi di vRNA attraverso le sequenze EIS

CICLO DI REPLICAZIONE FUSIONE Trascrizione mRNA Sintesi di proteine Trascrizione vRNA Trascrizione mRNA FUSIONE Assemblaggio e gemmazione Sintesi di proteine virus Sendai

CLASSIFICAZIONE PARAMYXOVIRIDAE 2 Sottofamiglie: Pneumovirinae Pneumovirus virus respiratorio sinciziale (RSV) uomo virus respiratororio bovino Genere Morbillivirus virus del morbillo uomo virus del cimurro del cane Rubulavirus virus della parotite uomo Respirovirus virus parainfluenzale 1-3 uomo virus Sendai topo Henipavirus virus Hendra uomo/equini virus Nipah uomo/suini Ospite Specie Paramyxovirinae * infezione vie aeree superiori

Virus Respiratorio sinciziale - RSV isolato nel 1956 1- infezione delle prime vie aeree 2- infezione delle vie aeree profonde SINCIZI in cellule epiteliali infettate con RSV danno immunomediato (necrosi ed edema della mucosa dei bronchi ) grave infezione in età pediatrica ospedalizzazione nel 30% dei casi

3- infezione delle parotidi (infiammazione locale=orecchioni) Virus della Parotite isolato nel 1945 ospite:uomo 1- replicazione nelle cellule epiteliali delle vie aeree superiori 2- linfonodi locali - distali - organi del SRE 3- infezione delle parotidi (infiammazione locale=orecchioni) Complicazioni orchite (20%; più frequente negli adulti)

virus del Morbillo MPR (trivalente): altri sintomi e complicazioni From Flint et al., ASM Press, 2004 altri sintomi e complicazioni otite polmonite infezioni al CNS (as SSPE, subacute sclerosing panencephalitis) Vaccino attenuato MPR (trivalente): Morbillo (Paramyxoviridae), parotite(Paramyxoviridae), rosolia (Togaviridae) 15 mesi di età febbre alta