LA DIMOSTRAZIONE CHE UNA SEQUENZA E’ UN

Presentazione sul tema: "LA DIMOSTRAZIONE CHE UNA SEQUENZA E’ UN"— Transcript della presentazione:

1 LA DIMOSTRAZIONE CHE UNA SEQUENZA E’ UN
SEGNALE PREVEDE ESPERIMENTI DI: 1. RIMOZIONE DELLA SEQUENZA 2. MUTAZIONE DELLA SEQUENZA 3. TRASFERIMENTO DELLA SEQUENZA SU UN’ALTRA PROTEINA

2 LE SEQUENZE SEGNALE DI LOCALIZZAZIONE NEL NUCLEO HANNO CARATTERISTICHE IN COMUNE
PROTEINA ANTIGENE T (SV40) PROTEINA 72kDa (adenovirus) VP2/3 (polioma) 70kDa (drosophila) c-myc (pollo) SEQUENZA Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val Pro-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Arg Gln-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Leu Lys-Arg-Gly-Lys-Arg-Lys-Lys Glu-Gln-Lys-Arg-Arg-Arg-Arg

3 NUCLEAR LOCALIZATION SIGNALS
LE SEQUENZE SEGNALE DI LOCALIZZAZIONE NEL NUCLEO HANNO CARATTERISTICHE IN COMUNE NLS NUCLEAR LOCALIZATION SIGNALS 1. SEQUENZE RICCHE IN AA BASICI PKKKRKV 2. ALL’INTERNO DELLA PROTEINA! 3. FREQUENTEMENTE BIPARTITE!!

4 LE SEQUENZE SEGNALE VENGONO RICONOSCIUTE DA RECETTORI SPECIFICI: LE IMPORTINE

5 SI POSSONO INDIVIDUARE PIU’ TAPPE NEL TRASPORTO NUCLEARE
1. PROTEINE SOLUBILI (IMPORTINE) RICONOSCONO LE NLS 2. IL COMPLESSO IMPORTINE-PROTEINA NUCLEARE SI LEGA ALLE PROTEINE DEL PORO (NUP) (RIPETIZIONI FG) 3. IL PORO SI DILATA ED IL COMPLESSO LO ATTRAVERSA 4. L’IMPORTINA SI DISSOCIA DALLA PROTEINA NUCLEARE 5. L’IMPORTINA TORNA NEL CITOSOL

6 ILLUSTRAZIONE SEMPLIFICATA DEL PASSAGGIO DI PROTEINE ATTRAVERSO IL PORO NUCLEARE
CITOSOL NUCLEO

7 LA PROTEINA RAN E’ UN REGOLATORE CHIAVE DEL TRASPORTO DI PROTEINE NEL NUCLEO
RAN GTP GAP GEF RAN GDP Nel citosol

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9 nucleo involucro nucleare citosol proteina cargo importina b
NLS Ran RCC1 nucleo involucro nucleare citosol Ran GAP importina b proteina cargo importina  NLS importina b

10 ANCHE L’ESPORTAZIONE DI PROTEINE DAL NUCLEO RICHIEDE SEGNALI
NES NUCLEAR EXPORT SIGNALS 1. hnRNP A1 (38 RESIDUI AMMINOACIDICI) 2. hnRNP K 3. PK1 e Rev (RICCHE DI LEUCINA)

11 IL TRASPORTO NUCLEO>CITOSOL SI SVOLGE MEDIANTE TAPPE SIMILI A QUELLE CITOSOL>NUCLEO
1. PROTEINE SOLUBILI (ESPORTINA) RICONOSCONO LE NES 2. IL COMPLESSO ESPORTINA-PROTEINA NUCLEARE SI LEGA AL PORO 3. IL COMPLESSO ATTRAVERSA IL PORO 4. L’ESPORTINA SI DISSOCIA DALLA PROTEINA NUCLEARE 5. L’ESPORTINA TORNA NEL NUCLEO

12 nucleo involucro nucleare citosol esportina  complesso cargo cargo
Ran cargo nucleo involucro nucleare citosol Ran GAP Ran cargo

13 IL TRASPORTO ATTRAVERSO IL PORO E’ BIDIREZIONALE

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15 LE SEQUENZE SEGNALE POSSONO ESSERE MASCHERATE
involucro nucleare NLS legame ormone CITOSOL NUCLEO legame al DNA

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