Dipartimento dei Laboratori - UOS di Microbiologia 18/06/2015 Dal vitro al vivo: l’esperienza dell’ Ospedale pediatrico La diagnostica microbiologica molecolare.

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1 Dipartimento dei Laboratori - UOS di Microbiologia 18/06/2015 Dal vitro al vivo: l’esperienza dell’ Ospedale pediatrico La diagnostica microbiologica molecolare e l’impatto clinico Paola Bernaschi - Livia Gargiullo IRCCS Ospedale Pediatrico Bambino Gesù di Roma

2 IL CASO Morgana, 2 mesi 12 gg Ricovero presso altro nosocomio per distress respiratorio Trasferimento in DEA Area Rossa OPBG IOT + VM Inserimento CVC femorale per terapia e NPT Bronchiolite da VRS B

3 Anamnesi familiare: ndp Anamnesi personale: Nata da TC per pregresso TC, EG 36w + 6 (PN 2,580 Kg). Apgar 7-8. Non ancora effettuate vaccinazioni. Anamnesi patologica remota: Ricovero in 12^ giornata di vita presso OPBG per difficoltà di alimentazione e scarso accrescimento ponderale, dimessa con sospetto di RGE. BACKGROUND

4 DECORSO CLINICO Graduale miglioramento dinamica respiratoria Estubazione Helmet CPAP  HFNC Rimozione CVC Trasferimento presso reparto Immunoinfettivologia dopo 10gg

5 Febbre, irritabilità ed inappetenza SEPSI MENINGITE

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7 APPROCCIO DIAGNOSTICO-TERAPEUTICO RACCOMANDATO IN PAZIENTI DI ETÀ PEDIATRICA CON FEBBRE E POSSIBILE EVOLUZIONE IN SEPSI

8 Antigeni batterici su LIQUOR Es. colturale LIQUOR Emocoltura Indagini virologiche su LIQUOR Es. chimico-fisico LIQUOR Es. chimico-fisico delle urine Urinocoltura Ricerche molecolari su sangue Ricerche molecolari su LIQUOR Indagini virologiche su sangue Esami emato-chimici

9 GB 31.670/mmc, N 73.7%, L 15.6% Hb 8.2 g/dl PLT 144.000/mmc Prove di coagulazione nei limiti Funzionalità renale, epatica, elettroliti nella norma PCR 19.4 mg/dl Esame urine nella norma Ecografia transfontanellare nella norma

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11 MENINGITE da HiB Terapia con Ceftriaxone

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13 Liquorcoltura a 24h: negativa PCR su liquor (SeptiFast): campione insufficiente Liquorcoltura a 48h: Enterococcus faecalis PCR su sangue (SeptiFast): Enterococcus faecalis PCR per meningiti su liquor (Eusepscreen): negativa 12-24h 48h MENINGITE da Enterococcus faecalis Emocoltura: negativa

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16 21.4% coltura + PCR 78.6% PCR Meningiti: coltura vs PCR Papavasileiou K. et al., Mol Diag Ther, 2011

17 SeptiFast

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19 taglio sui “contaminanti” la terapia non interferisce rapidità della risposta bassa quantità di sangue sensibilità del metodo molecolare

20 E. faecalisH. influenzae b Antigeni battericinon rilevabilePOSITIVO SeptiFast sanguePOSITIVOnon rilevabile Eusepscreen meningite non rilevabilenegativo LiquorcolturaPOSITIVOnegativo CONFRONTO TRA METODICHE

21 Reazione aspecifica Ag batterici

22 Nei casi di meningite batterica, lo screening rapido per la ricerca degli antigeni batterici nel liquor non è raccomandato, perché l’affidabilità è controversa

23 E. faecalis: intrinsecamente resistente alle cefalosporine LINEZOLID, poi de-escalation ad AMPICILLINA DECORSO CLINICO Adeguamento terapia antibiotica Miglioramento condizioni cliniche Monitoraggio eco transfontanellare EEG + PEV/PEU+ RMN encefalo nella norma

24 il valore del microbiologo importanza del percorso diagnostico per l’outcome del paziente Lotta integrata

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26 Grazie