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Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006.

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4 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

5 Trascrizione e traduzione sono contemporanee

6 La sintesi dell’RNA avviene nella bolla di trascrizione

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8 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

9 La trascrizione altera la topologia

10 L’RNA polimerasi di E. coli

11 Le RNA polimerasi batteriche hanno cinque tipi di subunità
w nucleo enzimatico stabilita’ a2bb’ws

12 Struttura dell’RNA polimerasi batterica e della polimerasi II eucariotica

13 Le RNA polimerasi sono simili

14 L’RNA polimerasi del fago T7

15 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

16 Inibitori della trascrizione
Inibitore Enzima bersaglio Azione dell'inibitore Rifamicina Streptolidigina Actinomicina D a -Amanitina oloenzima proc. nucleo enz. proc. pol I eucariotica pol II eucariotica lega b e inibisce inizio e inibisce allungamento lega il DNA e inibisce allungamento lega la RNA polimerasi II

17 La trascrizione può essere divisa in tre stadi:
Inizio Allungamento Terminazione

18 Fasi della trascrizione

19 Inizio della trascrizione

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21 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

22 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

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24 Allungamento e terminazione

25 I promotori procariotici

26 La“Pribnow box” nei promotori di E.coli
fd ..TGCTTCTGACTATAATAGACAGGGTAAAGACCTGATTTTTGA T7 A3 AAGTAAACACGGTACGATGTACCACATGAAACGACAGTGAGTCA T7 A2 AGTAACATGCAGTAAGATACAAATCGCTAGGTAACACTAGCAG. Lac-UV- 5 GCTTCCGGCTCGTATAATGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAA. l P ACCTCTGGCGGTGATAATGGTTGCATGTACTAAGGAGGTTG... R l P L ACCACTGGCGGTGATACTGAGCACATCAGCAGGACGCACTGAC. Tyr tRNA ..CGTCATTTGATATGATGCGCCCCGCTTCCCGATAAGGGAGCA Lac w.t. GCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAA. Consenso -10 T80A95T45A60A50T96 5-9 bp A/G T82T84G78A65C54A45 Consenso -35

27 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006

28 Il promotore di E.coli è costituito da tre componenti:
le sequenze consenso -35 e -10, e il sito d’inizio TATAAT TTGACA 5-9 basi 16-19 basi -10 -35 Sequenza -35 Pribnow box Sito di inizio della trascrizione +1

29 Promotori procariotici


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