RICKETTSIOSI ed EHRLICHIOSI EZIOLOGIA e DIAGNOSI DI LABORATORIO

Presentazione sul tema: "RICKETTSIOSI ed EHRLICHIOSI EZIOLOGIA e DIAGNOSI DI LABORATORIO"— Transcript della presentazione:

1 RICKETTSIOSI ed EHRLICHIOSI EZIOLOGIA e DIAGNOSI DI LABORATORIO
Dott.ssa Valentina Ebani Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti Facoltà di Medicina Veterinaria Università di Pisa

2 Parassiti intracellulari obbligati
EZIOLOGIA BATTERI  Gram negativi Giemsa Gimenez  Pleomorfi coccoidi/elissoidali Parassiti intracellulari obbligati liberi nel citoplasma in vacuoli intracitoplasmatici (Rickettsie) (Ehrlichie)

3 ZECCHE CELLULE BERSAGLIO CELLULE EMATOPOIETICHE CELLULE
MATURE O IMMATURE ENDOTELIALI Ehrlichie Rickettsie TRASMISSIONE TRAMITE VETTORI INVERTEBRATI ZECCHE

4 PRECEDENTE CLASSIFICAZIONE
ORDINE RICKETTSIALES Famiglia RICKETTSIACEAE Tribù Rickettsieae Genere Rickettsia Tribù Ehrlichieae Genere Ehrlichia Generi Coxiella Cowdria Neorickettsia Famiglia ANAPLASMATACEAE Generi Anaplasma Aegyptianella Haemobartonella Eperythrozoon Famiglia BARTONELLACEAE Genere Bartonella

5 STUDI GENOMICI SU Gene 16S rRNA Gene groESL Geni che codificano per proteine di membrana

6 ATTUALE CLASSIFICAZIONE
ORDINE RICKETTSIALES Famiglia RICKETTSIACEAE Genere Rickettsia Genere Orientia Famiglia ANAPLASMATACEAE Genere Anaplasma Genere Ehrlichia Genere Neorickettsia Genere Wolbachia Genere Cowdria

7 FAMIGLIA RICKETTSIACEAE
TYPHUS GROUP SPOTTED FEVER GROUP Rickettsia Orientia tsutsugamushi R. prowatzekii R. typhi R. canadensis R. rickettsii R. conorii R. felis R. helvetica R. akari R. sibirica

8 entrata moltiplicazione rilascio

9 Rickettsia rickettsii
FEBBRE DELLE MONTAGNE ROCCIOSE ROCKY MOUNTAIN SPOTTED FEVER (RMSF) Ixodes ricinus

10 Rickettsia rickettsii

11 Rickettsia conorii FEBBRE BOTTONOSA DEL MEDITERRANEO
Rhipicephalus sanguineus

12 Rickettsia felis Rickettsia typhi CANE GATTO Ctenocephalides felis !?

13 FAMIGLIA ANAPLASMATACEAE
A. phagocytophila A. platys A. marginale A. bovis Anaplasma Ehrlichia Neorickettsia E. canis E. chaffeensis E. ewingii E. muris E. ruminantium N. risticii N. sennetsu N. helminthoeca

14 entrata moltiplicazione rilascio

15 Ehrlichia canis EHRLICHIOSI MONOCITICA
“PANLEUCOPENIA TROPICALE CANINA” Rhipicephalus sanguineus MONOCITI

16 Ehrlichia chaffeensis
EHRLICHIOSI MONOCITICA MONOCITI Ehrlichia ewingii EHRLICHIOSI GRANULOCITICA GRANULOCITI

17 Anaplasma phagocytophila
“EHRLICHIOSI” GRANULOCITICA Ixodes ricinus

18 Neorickettsia risticii
EHRLICHIA MONOCITICA “POTOMAC HORSE FEVER” MONOCITI

19 DIAGNOSI DI LABORATORIO

20 DIAGNOSI INDIRETTA Immunofluorescenza indiretta “gold standard”
Soglia di positività 1:40 Ehrlichie 1:64 Rickettsie SIERO

21 VANTAGGI: Vetrini IFI per E.canis A. phagocytophila N. risticii R. conorii R. rickettsii R. typhi R. prowazekii Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti - Pisa SVANTAGGI: Attrezzatura Lettura

22 ALTRI TEST SIEROLOGICI
E. canis KIT COMMERCIALI Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) ANTIGENI whole cell Proteine ricombinanti (p30 p30-1) Proteina ricombinante (rMAP2)

23 CANI CON EHRLICHIOSI IN FASE NON ACUTA HANNO TITOLI ANTICORPALI BASSI
SENSIBILITA’ KIT Ridotta con titoli anticorpali 1:40 – 1:80 CANI CON EHRLICHIOSI IN FASE NON ACUTA HANNO TITOLI ANTICORPALI BASSI

24 PROBLEMA CROSS-REAZIONI
NON CONFONDERE LE CROSS-REAZIONI CON LE CO-INFEZIONI Frequenti le co-infezioni legate allo stesso vettore E. canis / R. conorii A. phagocytophila / R. rickettsii

25 DIAGNOSI DIRETTA Ehrlichiosi
STRISCIO buffy coat sangue da vasi capillari aspirato tissutale da milza , polmone, linfonodi (E. canis)

26 Su stipite isolato sono possibili studi spr di ordine epidemiologico
ISOLAMENTO difficoltà di esecuzione linee cellulari diverse laboratorio di classe 3 (eccetto E. canis) Su stipite isolato sono possibili studi spr di ordine epidemiologico

27 DIAGNOSI MOLECOLARE Sangue in EDTA buffy coat Tessuti Estrazione DNA
Polymerase chain reaction (PCR) Utilizzo di primer diversi a seconda dell’agente eziologico ricercato

28 E. canis E. chaffeensis A. phagocytophila N. risticii Rickettsia spp.
Presso Dip. Patologia Animale, Profilassi e Igiene degli Alimenti, Università di Pisa E. canis E. chaffeensis A. phagocytophila N. risticii Rickettsia spp. sequenziamento

29 CONCLUSIONI Diversi agenti responsabili di ehrlichiosi e rickettsiosi nel CANE Sierologia mediante IFI Ausilio offerto da metodiche molecolari