Tecniche per la coltura dei Batteri

Presentazione sul tema: "Tecniche per la coltura dei Batteri"— Transcript della presentazione:

1 Tecniche per la coltura dei Batteri
Roma, 12 marzo 2013

2 Classi 3 E – 3 I Con questa esercitazione abbiamo calcolato il numero di batteri (Escherichia Coli) presenti in una coltura (conta vitale) e ne abbiamo saggiato la resistenza a vari antibiotici (antibiogramma)

3 La conta vitale Con questa tecnica si contano solo le cellule in grado di dividersi e di dare origine a progenie. Presupposto: ogni colonia si è generata da una singola cellula batterica. Necessita di terreni di coltura appropriati piastramento di superficie piastramento da inclusione in entrambi i metodi per ottenere un conteggio valido devono essere presenti sulla piastra da 30 a 300 colonie. Piastramento di superficie Si prelevano 0,1ml dalla sospensione batterica opportunamente diluita e si deposita su piastra Petri contenente il terreno di coltura appropriato, dopo qualche giorno è possibile osservare le colonie e contarle.

4 Antibiogramma: con questa analisi si misura la sensibilità di un microrganismo in coltura nei riguardi di diversi antibiotici. Piastramento da inclusione Operativamente si inocula un terreno di crescita con un microrganismo e si valuta l’effetto inibente la crescita microbica nell’area circostante i vari dischetti di carta contenenti gli antibiotici. L’ampiezza dell’alone di inibizione della crescita del microrganismo dipende dalla sensibilità dell’agente patogeno al particolare antibiotico e dalla sua concentrazione.

5 Antibiogramma Analisi degli aloni di inibizione
Si utilizza per determinare l’attività di un antibiotico verso un microrganismo patogeno Analisi degli aloni di inibizione

6 I batteri crescono nel terreno formando una patina opaca
I batteri crescono nel terreno formando una patina opaca. L’antibiotico presente nel dischetto diffonde impedendo la crescita dei batteri

7 Piastre utilizzate per la conta vitale dei batteri
250 colonie

8 Piastra con antibiogramma
Antibiotici utilizzati: Ampicillina (Ap) Kanamicina (Km) Tetraciclina (Tc) Streptomicina (Sm) Le concentrazioni di antibiotico contenute nei dischetti sono dosate sulla base delle rispettive quantità utilizzabili in terapia

9 I nostri risultati

10

11

12 Dati Sperimentali

13

14

15

16

17

18 Conclusioni Antibiotico migliore per effettuare la terapia: Ampicillina (alone dell’inibizione della crescita dei batteri statisticamente e sistematicamente maggiore per tutti i gruppi di lavoro) In base alla loro efficienza statistica relativa la scelta di un antibiotico alternativo cadrebbe dapprima sulla Kanamicina e infine sulla Tetraciclina Batteri resistenti alla Streptomicina (assenza di alone di inibizione batterica)