SISTEMA GASCROMATOGRAFICO:

Presentazione sul tema: "SISTEMA GASCROMATOGRAFICO:"— Transcript della presentazione:

1 SISTEMA GASCROMATOGRAFICO:
- Sorgente di gas di trasporto Iniettore Colonna capillare gascromatografica Rivelatore Registratore

2 GAS DI TRASPORTO (FASE MOBILE DELLA COLONNA):
elio, azoto, idrogeno, argon. Caratteristiche importanti: - purezza, - scarsa reattività, - capacità di separazione.

3 SISTEMA DI INIEZIONE FUNZIONI: Introduzione del campione
Evaporazione del campione Ingresso del gas di trasporto Collegamento alla colonna

4 COLONNA CAPILLARE - È il cuore del sistema gascromatografico, dove avviene la separazione delle sostanze - È un tubo aperto di vetro o di metallo con diametro interno di 0,1 – 0,5 mm e una lunghezza di decine di metri - È costituta da due fasi : 1) una fase fissa depositata lungo le pareti interne della colonna 2) una fase mobile, ossia il gas di trasporto che attraversa la colonna.

5 Il cromatogramma è un istogramma con i valori del tempo di ritenzione
sulle ascisse, e delle abbondanze sulle ordinate.

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7 Analisi gascromatografica
Cromatogramma tempo di ritenzione area del picco Analisi qualitativa Analisi quantitativa

8 RETTA DI TARATURA

9 Ogni picco del cromatogramma corrisponde a un componente del
campione iniettato, ed è contraddistinto da un’ abbondanza relativa e da uno specifico valore del tempo di ritenzione. Il tempo di ritenzione di ogni molecola è un valore relativo, che dipende dal tipo di fase stazionaria, dalla lunghezza della colonna, dalla pressione del gas e dalla temperatura del forno. Utilizzando lo stesso sistema gascromatografico nelle stesse condizioni di analisi, il tempo di ritenzione rimane una caratteristica costante e fondamentale per l’identificazione di ogni molecola della miscela.

10 Lo spettrometro di massa
1) il sistema di entrata; 2) la sorgente ionica, il cuore dello spettrometro, in cui le molecole neutre vengono trasformate in ioni e si frammentano; 3) l’analizzatore, in cui gli ioni vengono separati in funzione del rapporto massa/carica (m/z); 4) il rivelatore, in cui gli ioni vengono raccolti ed i segnali inviati, dopo amplificazione, al registratore che converte le informazioni contenute nei segnali in uno spettro.

11 SORGENTE IONICA 1) M + e M e- M M3+ 2) M+ M M4+ , etc.

12 Ogni molecola ha una frammentazione unica e
caratteristica che, come una vera e propria impronta digitale, ci permette di identificare e di risalire alla molecola madre.

13 Analizzatore a quadrupolo

14 RIVELATORE a moltiplicazione di elettroni

15 Spettro di massa della 5,7-dimetossicumarina MW = 206
OCH3 M+ = 206 M+ - CH3 = 191 M+ - CH3CO = 163 M+ - CH3CO – CH3 = 148 M+ - CH3CO – CH3CO = 120 OCH3

16 Nelle analisi GC – MS, sono alla fine disponibili due dati
sufficienti e fondamentali per l’identificazione e la quantificazione di un composto incognito: 1) il tempo di ritenzione 2) lo spettro di massa

17 Analisi GC-MS della 5,7-dimetossicumarina standard
OCH3 H3CO M+ - CH3 = 191 M+ - CO = 178 M+ - CH3CO = 163 M+ - CH3CO – CH3 = 148 M+ - CH3CO – CO = 135 M+ - CH3CO – CH3CO = 120

18 FLAVONOIDI FUNZIONI: colore dei frutti e dei fiori; protezione UV;
fitoalessine; fenomeni simbiontici; deterrenti alimentari.

19 Campferolo Quercetina Attività: antiossidante; antiprotozoica;
antivirale; anticarcinogenica Quercetina Attività: antiossidante; anti-infiammatoria; antiaggregante; vasorilassante; anticarcinogenica

20 CUMARINE FUNZIONI: CUMARINA antimicrobiche; allelopatiche;
schermatura dagli UV; deterrenti alimentari. CUMARINA (1,2-BENZOPIRONE)

21 7-idrossicumarina (Umbelliferone)
Attività: chemoprevenzione del cancro 6,7-dimetossicumarina (Scoparone) Attività: antiossidante, vasorilassante, antiasmatico Psoralene (furanocumarina lineare) Attività: cura di eczemi e psoriasi Angelicina (furanocumarina angolare) Attività: antiinfiammatoria

22 ALCALOIDI La prima medicina del genere umano Composti vegetali farmacologicamente attivi contenenti un atomo di azoto nicotinici (la nicotina, ha un effetto sia stimolane che deprimente sul sistema nervoso); benzilisochinolinici (morfina, codeina, papaverina, berberina, sanguinarina); indolici (vincristina, vinblastina, vincamina, stricnina, chinina, aimalicina); pirrolidinici (cocaina, atropina); pirrolizidinici e piperizidinici; purinici (caffeina); curari (toxiferina).

23 TERPENI Metaboliti vegetali costruiti da unità ripetute di molecole di isoprene C5 monoterpeni C10: responsabili del profumo di numerose piante (il mentolo della menta); sesquiterpeni C15: deterrenti alimentari (il gossipolo) o molecole aromatiche (il bisabololo della camomilla); diterpeni C20: fitoalessine (il casbene del ricino) e precursori delle GIBBERELLINE; triterpeni C30: deterrenti alimentari (l’azodiractina, che inibisce il senso di fame e il lupeolo, precursore delle SAPONINE); tetraterpeni C40: precursori di licopene, carotenoidi e xantofille.

24 Estrazione in metanolo
polverizzazione delle foglie essiccate; aggiunta di metanolo; agitazione per 2 ore a temperatura ambiente; centrifugazione a 4000 x g per 10 minuti; altri due processi estrattivi del pellet; filtrazione attraverso un sistema di vuoto; concentrazione con un evaporatore rotante; analisi al gascromatografo-spettrometro di massa (GC-MS).

25 Microestrazione in fase solida (SPME)
estrazione rapida senza solventi; assorbimento e concentrazione degli analiti del campione sulla superficie della fibra; desorbimento degli analiti nell’iniettore del gascromatografo.

26 Estrazioni SPME: 1) diretta
2) spazio di testa (HS)

27 I) assorbimento II) desorbimento al GC
SPME dell’estratto: trasferimento del campione nella vial e salatura; agitazione e riscaldamento del campione fino a 50°C; acidificazione; estrazione per un intervallo di tempo variabile; desorbimento della fibra al gascromatografo.

28 Identificazione della 5,7-dimetossicumarina nell’ESTRATTO in METANOLO
OCH3 H3CO 5,7-dimetossicumarina

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