La diagnosi delle malattie del legno: i giallumi della vite 5 febbraio 2016 FIERAGRICOLA - Verona La diagnosi delle malattie del legno: i giallumi della vite Quaglino Fabio, Paola Casati, Piero Attilio Bianco WORKSHOP ENOVITIS Gestione della chioma: Potatura e sanità delle piante

Giallumi della vite: complesso di malattie In Europa Malattia Fitoplasma Vettore Flavescenza dorata (FD) 16SrV-C / -D Scaphoideus titanus Legno nero (LN) 16SrXII-A Hyalesthes obsoletus Giallume della vite del Palatinato (PGY) Altri giallumi della vite 16SrV-C 16SrI-B /-C 16SrIII 16SrV-A 16SrX-B Oncopsis alni Undetermined Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Accartocciamento fogliare Alterazioni cromatiche Sintomi Accartocciamento fogliare Alterazioni cromatiche Disseccamento del grappolo Maturazione irregolare del legno Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Flavescenza dorata: ciclo biologico Orientus ishidae Alnus glutinosa Ailanthus altissima Dictyophara europea Clematis vitalba Vitis vinifera Scaphoideus titanus Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Altri vettori e piante ospiti Legno nero: ciclo biologico Vitis vinifera Urtica dioica Hyalesthes obsoletus Convolvulus arvensis ‘Ca. Phytoplasma solani’ Altri vettori e piante ospiti (Cvrkovic et al., 2014; Mori et al., 2015) Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Strategie di controllo di GY Flavescenza dorata impiego di materiale di propagazione sano trattamenti contro Scaphoideus titanus rimozione fonti di inoculo in zone focolaio Legno nero nessuna misura di controllo efficiente (pratiche agronomiche consigliate) Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

parassiti endocellulari obbligati COSA SONO I FITOPLASMI? parassiti endocellulari obbligati localizzati nelle cellule floematiche della pianta non coltivabili in vitro Nessuna possibilità di isolamento

Diagnosi: Identificazione fitoplasmi Estrazione DNA da nervature/piccioli ACCTGGCTGATGTGTGTAATGTGCCTGTATGCC TGGACCGACTACACACATTACACGGACATACGG Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Sviluppo di tecniche molecolari più sensibili Metodi diagnostici OSTACOLI Osservazione dei sintomi: identificazione di infezioni latenti Distribuzione irregolare dei fitoplasmi nei tessuti della pianta infetta Bassa concentrazione in piante infette, ma asintomatiche Variazioni stagionali nella concentrazione dei fitoplasmi Sviluppo di tecniche molecolari più sensibili Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Metodi diagnostici: DIACERVIT Flavescenza dorata Legno nero Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Metodi diagnostici: DIACERVIT SVILUPPO SONDE TaqMan SPECIFICHE Tempi diagnostici molto ridotti (20 minuti) Possibilità di analizzare contemporaneamente un numero molto elevato di campioni (384/piastra) Sensibilità molto più alta rispetto alle tecniche tradizionali di diagnosi basate sulla PCR Costi ormai comparabili (numeri elevati) Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Trasmissione del fitoplasma associato a Legno nero attraverso portainnesti Friuli Venezia Giulia: alto numero di viti infette da LN innestate su 420A e SO4 (Ermacora et al., 2011) Fitoplasma associato a FD trasmesso via portainnesti (Borgo et al., 2009) ChH RootH ChI a b c d Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

Trasmissione del fitoplasma associato a Legno nero attraverso portainnesti Anche il fitoplasma associato a LN può essere trasmesso via portainnesti Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016

PROSPETTIVE Metodi diagnostici Identificazione di piante ospiti / insetti vettori Maggior sensibilità di identificazione dei fitoplasmi nelle piante madri PROSPETTIVE SVILUPPO DI TECNICHE “LAB-ON-A-CHIP” UTILIZZABILI DALL’OPERATORE DIRETTAMENTE IN CAMPO Quaglino, Casati, Bianco ENOVITIS – Verona, 5 Febbraio 2016