Cosa insegna l’esperienza traslazionale? Raccolta campioni retrospettiva difficile e poco produttiva (prospettica molto efficace) Emendamenti lenti da implementare Molti dati preliminari non confermati in MITO2

XXIV MITO Meeting Pisa, 4 Dicembre 2014 MITO-7 Emendamento 3 Progetti Traslazionali

Emendamento 3 Approvato dal Comitato Etico Coordinatore nel Dicembre 2012 Aggiunge un sottostudio biologico su campioni di tessuto Prevede uno specifico consenso informato per l’uso dei campioni tumorali

Aims of the Project Aim A: Assessment of biomarkers predictive of response/resistance to chemotherapy Aim B: Assessment of the antiangiogenic effect of weekly paclitaxel

AIM A substudies-1 Sub-study 1: validation of selected therapeutic targets and/or predictive biomarkers of drug resistance Proponents: CRO,Oncologia Sperimentale 2 - Dr. G. Baldassarre, Dr. M. Schiappacassi, Dr. V. Canzonieri Sub-study 2: CDKs, survivin, p57 Proponents: Istituto Nazionale Tumori Napoli;Genomica Funzionale - Dr. D. Califano, Dr. G.Chiappetta. Sub-study 3: Imbalance between apoptosis and autophagy in ovarian cancer response to different chemotherapy regimens Proponents: INT Milano - Dr. M. Bagnoli, Dr. D. Mezzanzanica, Dr. S. Canevari.

AIM A substudies-1 Sub-project 4: TRAP1 as a novel biomarker predictive of resistance to platinbased chemotherapy. Proponents: Università Federico II - Prof F. Esposito; Università di Foggia - Dr. M. Landriscina. Sub-project 5: Pharmacogenetic markers of the therapy outcome Proponent: CRO– Farmacologia Sperimentale e Clinica - Dr. G. Toffoli, Dr. E. Cecchin, Dr. P. Biason, Dr. F. Rizzolio. Sub-project 6: Methilation of BRCA and TGFBI in ovarian cancer. Proponents: Istituto Regina Elena - Dr. M.A. Carosi; Dr. A. Savarese. Sub project 7: Molecules involved in chemoresistance to taxane containing regimens: Class III -tubulin, Class V -tubulin, PIM- 1,NEK-6, and Tau protein. Proponents: Univ. Cattolica S.C. - Prof. G.Scambia, Dr. Cristiano Ferlini, Dr. G. Ferrandina.

AIM B substudies Sub-project 8: Ephrin signalling and HOXB3/D3 pathway in angiogenesis process of ovarian cancer progression. Proponents: Istituto Nazionale Tumori Napoli; Anatomia Patologica - Dr R. Franco, Dr.ssa S. Losito. Sub-project 9: CD31 and VEGFR in ovarian cancer. Proponent: Univ Cattolica S.C.; Unità Ginecologia oncologica - Dr. G. Ferrandina.

Cosa abbiamo previsto ObiettivoBiomarcatori A. Valutazione di biomarcatori predittivi della risposta o della resistenza al trattamento a.TRAP-1, Grp78/Bip, Chop (Università Federico II – Napoli; Università di Foggia) b.Espressione di un pannello di 15 geni selezionati mediante shRNA (CRO Aviano) c.Farmacogenomica (CRO – Aviano) d.CDKs, survivina, p-57 (INT - Napoli) e.c-FLIP, p53, cav1, LC3, p62, Lamp1 (INT - Milano) f.β-tubulina Classe III, β-tubulina Classe V, PIM- 1,NEK-6 e proteina Tau (Università Cattolica – Roma/Campobasso) g.Metilazione BRCA e TGFBI (IRE – Roma) B. Valutazione dell’attività antiangiogenica del paclitaxel settimanale a.Ephrins, HOXB3, HOXD3 (INT – Napoli) b.VEGFR1, 2 e 3, CD31 (Università Cattolica – Roma/Campobasso)

MITO-16/MANGO-OV2 (Fase4 & 3) Progetti Traslazionali XXIV MITO Meeting Pisa, 4 Dicembre 2014

Background Ten research groups according to their experience, collected preliminary data and literature and decided to investigate several potential biomarkers of Bevacizumab activity and/or patients outcome. These biomarkers can be divided in three main group including: 1.Circulating biomarkers 2.Circulating and tissutal biomarkers 3.Tissutal biomarkers 4.Circulating cell 5.Pharmacogenomics

1.Circulating biomarkers-1 The following biomarkers will be evaluated: sALCAM &IL-18: IRCCS S.Martino-ISR Genova (Dr Marina Fabbi & Dr Silvano Ferrini) TSP-1, MMP-2/MMP-9, TIMP-1/TIMP-2: Istituto Mario Negri (Dr Raffaella Giavazzi) IL-6, PDGF and VEGF-B: IEO (Dr Francesco Bertolini) Endostatin: Univ Cattolica S.C. (Dr Gabriella Ferrandina) IL-6 & PAI: INT-Milano (Dr Antonella Tomassetti & Dr Silvana Canevari)

1.Circulating biomarkers-2 Due to the interest expressed by multiple labs the following biomarkers will be evaluated centrally at Roche Diagnostic, Pentzberg (D): VEGFA, sVEGFR-1, sVEGFR-2, e-selectin, VEGFR-3, IL-8, bFGF, SDF 1α, PDGF-C, GCSF, VEGF-B, VEGF-C ICAM-1

2.Circulating and tissutal biomarkers –Proteins The following biomarkers will be evaluated: t-ALCAM ADAM17/TACE: IRCCS S.Martino-ISR Genova (Dr Marina Fabbi & Dr Silvano Ferrini) CD-31, VEGF, VEGFR1-3: Univ Cattolica S.C. (Dr Gabriella Ferrandina) EGFR, IL-6 & PAI: INT-Milano (Dr Antonella Tomassetti & Dr Silvana Canevari)

2.Circulating and tissutal biomarkers –miRNAs 2 Consortia: 1.“microRNAoma: Drs S.Canevari, D.Mezzanzanica,L. De Cecco, M.Bagnoli (INT-Milano) & Drs M.D’Incalci, S.Marchini (IRFMN) 2.“Validation” of a profile discerning RvsNR and evaluating if the predictive role is extensible to Beva containing Rx

3.Tissutal Biomarkers The following biomarkers will be evaluated: Ephrin & HOXB3/D3: INT-Napoli (Drs Renato Franco & Simona Losito) TRAP1/HSP90: Università Federico II (Prof F. Esposito); Università di Foggia (Dr. M. Landriscina). LKB1/AMPK & MCT1/MCT4: IOV (Dr Stefano Indraccolo) Endothelin & HIF-1: INT-Napoli (Drs Daniela Califano & G.Chiappetta)

4.Pharmacogenomics The aim of the study is to follow a pathway-based approach: 1)to identify genetic markers of tumor response and patients toxicity in ovarian cancer patients treated with conventional chemotherapy, 2)to identify genetic markers related to the angiogenesis process that could identify responders to bevacizumab association therapy, and 3)to integrate genetic and environmental factors in a comprehensive predictive model of therapy outcome in ovarian cancer patients

5.Circulating Endothelial Cells The present project will investigate the predictive, dynamic and escape biomarker potential of CECs and CEPs in ovarian cancer patients enrolled in the Mito/Mango trial. CEC/CEPs will be enumerated before the beginning of the therapy, after 8 weeks and at the end of the study.

#centri Pazienti Totale pzSample B1B2B3B1/2B1/2/ 3 B1/B3Solo B1 Solo B2 Solo B3 B2/316B IEO NA – INT IOV11 (NV) CAMPIONI PERVENUTI: sample IEO: B1=basale B2= after 8 weeks B3=end of CT or BEVA? INT-Na: B1=basale B2= End CT/progr B3=end BEVA

Come procedere? Passare alla fase delle analisi per MITO 7 (selezionare biomarcatpri ancora Hot) Ripensare al progetto MITO 16 (riunione dedicata)