BIOLOGIA MOLECOLARE E CELLULARE DEI TUMORI IN ETA’ PEDIATRICA Dott.ssa E. Muccioli

Alterazioni nei normali processi cellulari Le neoplasie sono un complesso di malattie derivanti da alterazioni che si possono verificare in un vasto numero di geni Alterazioni nei normali processi cellulari Traduzione del segnale, controllo del ciclo cellulare, crescita e differenziazione cellulare Riparazione DNA Regolazione translazionale Senescenza e apoptosi Cellule staminali neoplastiche possono dare origine a tumore con capacità proprie di rigenerazione e proliferazione simili a cell staminali non maligne Dott.ssa E. Muccioli

SCHEMA Geni coinvolti nell’oncogenesi Oncogeni Amplificazione Mutazione puntiforme Traslocazione Oncosoppressori Modello due fasi RB p53 Sindromi che predispongono allo sviluppo di neoplasie Altri fattori associati all’oncogenesi Virus Imprinting genomico telomerasi Dott.ssa E. Muccioli

GENI COINVOLTI NELL’ONCOGENESI Due classi principalmente coinvolte Oncogeni Oncosoppressori Dott.ssa E. Muccioli

ONCOGENI Dott.ssa E. Muccioli

ONCOGENI Proto-oncogeni sono geni fisio che codificano e regolano fattori di trascrizione, di crescita, recettori implicati nella crescita, moltiplicazione e differenziazione cellulare Quando i proto-oncogeni si alterano danno origine agli oncogeni che possono innescare una trasformazione maligna Si possono individuare utilizzando ad es fluorescenza di ibridazione in situ con sonde specifiche alle diverse mutazioni: la fluorescenza si lega sul cromosoma-gene alterato sui nuclei di cellule in interfase: si valutano i diversi gradi di fluorescenza per indicare il valore Attraverso 3 principali meccanismi Amplificazione, mutazioni puntiformi, traslocazione Dott.ssa E. Muccioli

ONCOGENI AMPLIFICAZIONE ONCOGENE MYC Codifica per proteina regolante la trascrizione Neuroblastoma con prognosi peggiore Dott.ssa E. Muccioli

ONCOGENI MUTAZIONI PUNTIFORMI ONCOGENE NRAS Proteina che lega il nucleotide guanina con attività attiva di guanosina trifosfatasi, imp nel segnale di traduzione Aumentato nel 30% delle Leucemie Acute non mieloidi ONCOGENE RET Recettore transmembrana tirosinchinasi costitutivamente attivo, imp segnale di traduzione Sindromi con neoplasie multiple e forme famigliari di carcinoma della tiroide Dott.ssa E. Muccioli

ONCOGENI TRASLOCAZIONE CROMOSOMICA Oncogene per regolazione del fattore di trascrizione dei recettore cellule T o per Ig  quindi le cellule trascrivono maggiormente i recettori o le Ig Leucemia e Linfomi Molto conosciuto nella leucemia mieloide cronica è il cromosoma Philadelphis t(9;22) che produce la proteina BCR/ABL cioè tirosinchinasi costituzionalmente attiva e posizionata vicino al nucleo esponendola a un nuovo spettro di substrati Oncogene derivante dalla fusione di geni Produzione di proteina chimerica con attività nuove e potenzialmente oncogenica Tumori solidi (sarcoma di Ewing, rabdomiosarcoma alveolare) Dott.ssa E. Muccioli

ONCOSOPPRESSORI Dott.ssa E. Muccioli

ONCOSOPPRESSORI Oncosoppressori sono geni imp nella regolazione della crescita cellulare e in apoptosi (morte cellulare programmata) Sono oncogeni recessivi perché è necessaria la loro inattivazione in entrambi gli alleli per dare origine alla neoplasia Dott.ssa E. Muccioli

Modello di sviluppo del tumore in due fasi di Knudson Studio su gene oncosoppressore RB nel Retinoblastoma Forme sporadiche: entrambi gli alleli devono essere inattivati Due fasi Forme famigliari: i bambini ricevevano già un allele inattivato, era necessaria solo un’altra mutazione sull’unico allele sano per avere la malattia Una sola fase Dott.ssa E. Muccioli

Oltre il 50% dei tumori ha la p53 alterata Gene oncosoppressore p53 previene la replicazione cellulare se presente danno cromosomico e innesca l’apoptosi cellulare qualora la cellula presenti un danno cromosomico non riparabile Oltre il 50% dei tumori ha la p53 alterata Carcinoma della mammell, colon-retto, polmone, esofago, stomaco, ovaio, prostata, gliomi, sarcomi, leucemie Dott.ssa E. Muccioli

SINDROMI CHE PREDISPONGONO ALLO SVILUPPO DI NEOPLASIE Dott.ssa E. Muccioli

Meccanismi principali presenti nelle sindromi Inattivazione di geni oncosoppressori Deficit nei processi di riparazione del DNA Difetti di sorveglianza da parte del sistema immunitario Dott.ssa E. Muccioli

Inattivazione di geni oncosoppressori Retinoblastoma famigliare Maggiore rischio di sviluppare osteosarcoma Sindrome di Li-Fraumeni : allele p53 alterato : maggiore sviluppo di sarcomi, leucemie, neoplasie mammella, osso, polmoni, cervello Neurofibromatosi Ereditata Spesso come autosomica dominante 50% dei casi mutazione spontanea del gene NF1 con anamnesi famigliare negativa Alto rischio di sviluppare schwannomi maligni e feocromocitomi Dott.ssa E. Muccioli

Deficit di processi di riparazione DNA Ridotta capacità di riparazione DNA porta ad un accumulo di mutazioni cromosomiche con aumento delle probabilità di sviluppare neoplasie, soprattutto Leucemie Sindrome di Bloom Clinica: bassa statura, eritema teleangectasico fotosensibile Atassia teleangelectasica Con progressiva degenerazione dei motoneuroni Anemia di Fanconi Clinica: bassa statura, malformazioni scheletriche e renali, pancitopenia Xeroderma pigmentoso Raggi ultravioletti causano danno DNA che non viene riparato Trasmissione autosomica recessiva (quali di queste pato???) Dott.ssa E. Muccioli

Difetti della sorveglianza da parte del sistema immunitario Sd Wiskott-Aldrich Grave immunodeficienza combinata Immunodeficienze comuni Sd linfo-proliferativa X-linked Le più comuni forme di neoplasia in questi pz sono leucemie e linfomi: pz con neopl+immunodeficit rispondono meno alla terapia  è imp il ruolo del sistema immunitario nella terapia e nella prevenzione delle neoplasie Dott.ssa E. Muccioli

ALTRI FATTORI ASSOCIATI ALL’ONCOGENESI Dott.ssa E. Muccioli

VIRUS Molti virus sono stati considerati come responsabili nella patogenesi delle neoplasie EBV virus di Epstein-Barr L’infezione EBV da sola non è in grado di causare la neoplasia Associazione con LINFOMA DI BURKITT LINFOMA CELLULE T Particolare perché normalmente EBV non infetta linfociti T CARCINOMA NASOFARINGEO Nei pz immunocompromessi Ruolo imp nella linfogenesi in malattia linfoproliferativa a cellule B si associa anche a leiosarcoma Dott.ssa E. Muccioli

VIRUS Molti virus sono stati considerati come responsabili nella patogenesi delle neoplasie HBV Bambini con infezione cronica di epatite B presentano un rischio di sviluppare epatocarcinoma di oltre 200 volte Se trasmissione perinatale, possono essere sufficienti 6-7 anni per lo sviluppo di epatocarcinoma !! (adulto contrae HBV, sono necessari 20 anni per sviluppare neoplasia epatica) HCV Fattore di rischio per epatocarcinoma e linfoma splenico Dott.ssa E. Muccioli

VIRUS Molti virus sono stati considerati come responsabili nella patogenesi delle neoplasie HPV Papillomavirus Alto rischio tipo 16 e 18 Basso rischio tipo 6 e 11 La presenza isolata non è sufficiente per la trasformazione neoplastica In corso di studio Ipotesi: coinvolgimento di p53 e RB alterando il ciclo cellulare Herpes virus HHV8 associato a sarcoma di Kaposi, linfoma primitivo a cellule B, variante della malattia diCastelman a plasmacellule in pz con AIDS HTLV-1 Virus umano della leucemia a cellule T di tipo 1 Correla con leucemia a cellule T dell’adulto e con il linfoma Dott.ssa E. Muccioli

IMPRINTING GENOMICO Imprinting genomico è la selettiva inattivazione di uno dei due alleli di un determinato gene dipendente dall’eredità dalla madre o dal padre Tumore di WIlms Gene materno IGF2 (Insuline grwth factor receptor2) viene fisio inattivato probabilente per la metilazione di specifiche sequenze CpG davanti al promotore dell’IGF2 a cui consegue l’inattivazione del gene stesso Pato: non c’è metilazione delle sequenze citate per cui il gene materno viene trascritto ed espresso Dott.ssa E. Muccioli

IMPRINTING GENOMICO Imprinting genomico è la selettiva inattivazione di uno dei due alleli di un determinato gene dipendente dall’eredità dalla madre o dal padre Sindrome di Beckwith-Weidemann Clinica: crescita eccessiva: macrosomia, macroglossia, emiipertrofia, onfalocele, malformazioni renali Nei pz con modificazioni del pattern di metilazione dei geni sul cromosoma 11p15 si è evidenziato rischio maggiore di sviluppare tumore di Wilms, epatoblastoma, rebdomiosarcoma, neuroblastoma,carcinoma adrenocorticale Fertilizzazione in vitro Correlata ad alterazioni dell’imprinting e a sviluppo di casi di sd Beckwith-Weidemann associata a tumori di Wilms e al retinoblastoma Dott.ssa E. Muccioli

TELOMERASI I telomeri sono una serie di decine o centinaia di sequenze TTAGGG ripetute al termine dei cromosomi Imp per stabilizzare le parti terminali dei cromosomi e limitare le rotture, traslocazioni, perdita DNA FISIO Durante i processi di replicazione del DNA si verifica un progressivo accorciamento dei telomeri Tale è segno di invecchiamento cellulare e può segnalare la senescenza Telomerasi : enzima che aggiunge telomeri alle porzioni terminali dei cromosomi PATO Se la telomerasi aggiunge telomeri causa una immortalizzazione della cellula/linea cellulare dando vantaggio di crescita rispetto alle altre cellule fisio dal momento che si permetto loro di continuare a moltiplicarsi Futura terapia potrebbe essere: inibire la telomerasi Dott.ssa E. Muccioli