DNA fingerprinting LLC Trieste.

Presentazione sul tema: "DNA fingerprinting LLC Trieste."— Transcript della presentazione:

1 DNA fingerprinting LLC Trieste

2 DNA fingerprinting E’ un metodo di identificazione che consiste nel comparare DNA provenienti da individui diversi al fine di metterne in risalto le similitudini LLC Trieste

3 “impronta digitale del DNA”
DNA fingerprinting Letteralmente: “impronta digitale del DNA” ...sottolinea la caratteristica di unicità del DNA : DNA diverso per individui diversi DNA uguale fra 2 individui SOLO se questi sono gemelli monozigoti identici LLC Trieste

4 IL DNA LLC Trieste

5 Utilizzi storici della tecnica
(analisi del polimorfismo RFLP) STUDI EVOLUZIONISTICI STUDI MEDICI MEDICINA FORENSE LLC Trieste

6 Scopo dell’esperienza
Riprodurre un’indagine della polizia scientifica, nel corso della quale il materiale rinvenuto sulla scena del delitto viene confrontato con quello di alcuni sospettati, tra cui va individuato il colpevole. A scopo didattico utilizzeremo come fonte di materiale da analizzare il DNA plasmidico. LLC Trieste

7 Il plasmide DNA circolare a doppio filamento autoreplicante
si trova in tutti i procarioti reca vantaggio ambientale ereditato in forma extracromosiomiale LLC Trieste

8 LA TECNICA Digestione: frammentazione del campione di DNA
ad opera degli enzimi di restrizione. Elettroforesi: separazione dei frammenti di DNA in funzione delle loro dimensioni. Colorazione: dei frammenti di DNA e loro osservazione LLC Trieste

9 Enzimi di restrizione E.R.
In natura fanno parte dell’arsenale difensivo procariotico contro i fagi, sono: sito specifici dna specifici LLC Trieste

10 Digestione L’E.R. taglia entrambi i filamenti di DNA interrompendo i legami tra lo zucchero e il fosfato. LLC Trieste

11 LA TECNICA Digestione: frammentazione del campione di DNA
ad opera degli enzimi di restrizione Elettroforesi: separazione dei frammenti di DNA in funzione delle loro dimensioni Colorazione: dei frammenti di DNA e loro osservazione LLC Trieste

12 Gel all’1% di agarosio Agarosio estratto dalle alghe Agar Agar
ELETTROFORESI Frammenti di DNA sottoposti a campo elettrico setaccio molecolare vengono separati in base alle loro dimensioni Gel all’1% di agarosio Agarosio estratto dalle alghe Agar Agar LLC Trieste

13 Immagine del gel d’agarosio
Tecnica utilizzata per separare molecole di DNA in base alle loro dimensioni. LLC Trieste

14 Corsa elettroforetica
La migrazione dei frammenti di DNA avviene in campo elettrico. LLC Trieste

15 Apparato elettroforetico
LLC Trieste

16 LA TECNICA Colorazione: dei frammenti di DNA e loro osservazione
Digestione: frammentazione del campione di DNA ad opera degli enzimi di restrizione Elettroforesi: separazione dei frammenti di DNA in funzione delle loro dimensioni Colorazione: dei frammenti di DNA e loro osservazione LLC Trieste

17 Colorazione ETIDIO BROMURO BIOSAFE LLC Trieste

18 Osservazione: chi è il colpevole
LLC Trieste