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Il superavvolgimento negativo
DNA superavvolto negativamente Il superavvolgimento negativo può convertirsi nella separazione locale dei due filamenti
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separazione dei filamenti (denaturazione di regioni ricche in A+T)
struttura Z (in corrispondenza di regioni di alternanza Pu/Py) strutture cruciformi (in corrispondenza di palindromi)
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Superavvolgimento del DNA
Positivo = DNA superspiralizzato Negativo = DNA sottospiralizzato
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Enzimi che alterano la topologia del DNA
Topoisomerasi: tipo I tipo II
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Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Topoisomerasi
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Enzimi che agiscono sugli acidi nucleici
Polimerasi: DNA polimerasi RNA polimerasi Nucleasi: esonucleasi endonucleasi
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Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Proprietà del DNA Appaiamento (associazione)
Denaturazione Rinaturazione
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Spettro di assorbimento del DNA
220 240 260 280 300 320 0.5 1.0 1.5 lunghezza d’onda (nm) Assorbanza effetto ipercromico
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Fusione (melting) della doppia elica
70 80 90 100 T ( °C) Assorbanza relativa 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 Fusione (melting) della doppia elica e misura del Tm (Temperature of melting = Temperatura di fusione) Tm = 83°C
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Dipendenza della denaturazione del DNA dal contenuto in G+C
Tm (°C) G+C (moli %)
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Fattori che influenzano la denaturazione
Temperatura Forza ionica pH
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B. LEWIN, IL GENE - Edizione compatta, Zanichelli Editore S. p. A
B. LEWIN, IL GENE - Edizione compatta, Zanichelli Editore S.p.A. Copyright © 2007
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Riassociazione del DNA
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Riassociazione del DNA
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Appaiamento su filtro (ibridazione)
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Sequenze palindromiche
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Strutture a "forcina"
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Struttura cruciforme
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Strutture dell'RNA
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Struttura "pseudonodo"
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Mutazioni Una modificazione chimica di una base
Incorporazione di una base sbagliata
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Il "Dogma centrale" Replicazione DNA Trascrizione inversa RNA
Traduzione Replicazione DNA RNA Proteina inversa
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