BIOCHIMICA DEL SANGUE Dott. Bianco Francesco Dirigente territoriale di area Nord/Ovest RLS A.O.U.P Membro CUG Area Nord/Ovest.

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1 BIOCHIMICA DEL SANGUE Dott. Bianco Francesco Dirigente territoriale di area Nord/Ovest RLS A.O.U.P Membro CUG Area Nord/Ovest

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6 PROTEINE PLASMATICHE Funzionalmente distinguibili in: 1.Immunoglobuline con funzione anticorpale 2.Proteine di trasporto( alb.,transf,aptogl.,emopessina TBG,SHBG,transcortina,RbP,etc.) 3.Fattori del complemento ( C3,etc. ) 4.Inibitori delle proteasi (alfa-1 antitripsina, etc.) 5.Proteine della fase acuta e della fase anti-acuta (CRP,etc.) 6.Fattori della coagulazione (fibrinogeno,etc.) 7.Lipoproteine (HDL,VLDL,LDL)

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8 PROTEINE PLASMATICHE Sul tracciato elettroforetico sono evidenziabili 7 frazioni più o meno eterogenee (in ordine dall’anodo al catodo): 1.Prealbumina 2.Albumina (35-50g/l) 3.Alfa-1 :alfa-1antitripsina,alfa-1glicoproteina acida,alfalipoproteine (HDL) (1-4 g/l) 4.Alfa-2 :alfa-2macroglobulina,aptoglobina,ceruloplasmina,pre-beta- lipoproteine (VLDL) (5-9g/l) 5.Beta-1 :transferrina,betalipoproteine (LDL) 6.Beta-2 :C3 del complemento,CRP (6-11 g/l) 7.Gamma : immunoglobuline (6-15 g/l)

9 ALBUMINA E’ la principale proteina del siero (60% delle plasmaproteine) Funzioni principali: 1.Trasporto di NEFA, bilirubina,ormoni,farmaci,ioni 2.Regolazione della pressione colloido-osmotica (80%) 3.Sistema tampone del pH del sangue Diminuzione di concentrazione: Epatopatie e malnutrizione (ridotta sintesi),ustioni,malattie renali,etc. (aumento delle perdite) Alterazione dell’equilibrio fra le pressioni colloido-osmotica ed idrostatica ed edema

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11 Elettroforesi proteine del siero

12 Migrazione elettroforetica ProteineFunzione Pre-albumina Indicatore nutrizionale Lega retinolo e ormoni tiroidei Albumina Maggiore contributo alla pressione oncotica (6g/100ml) Trasporta bilirubina, steroidi, ac.grassi  1 -globuline  1 -antitripsina (90% del totale!) Inibitore proteasi. Aumenta nell’infiammaz.; deficit congenito causa cirrosi e enfisema giovanili  1 -lipoproteine (HDL) Trasporto lipidi (colesterolo)  1 -antichimotripsina Inibisce serin-proteasi. Aumenta nell’infiammaz.  1 -glicoproteina acida Fase acuta infiammaz.  2 -globuline AptoglobineLegano emoglobina. Aumentano nell’infiammaz. CeruloplasminaInibitore perossidasi  2 -macroglobulina Inibitore trombina, pepsina, tripsina. Aumenta nella nefrosi.

13  -globulinePre-  lipoproteine (VLDL) Trasporto lipidi (trigliceridi) TransferrinaTrasporto ferro. Aumenta nell’anemia sideropenica. EmopexinaLega l’eme. Diminuisce nelle anemie emolitiche.  -lipoproteine (LDL) Trasporto lipidi (colesterolo)  2 -microglobulina Componente antigene HLA I. Aumenta nell’infiammaz. e diminuita clearance renale fibrinogenoPrecursore fibrina Complemento (C1,3,4)Risposta immune. Aumenta nell’infiammaz. Proteina C reattiva (CRP)Norm. assente, compare in fase acuta infiammaz. Opsonizza batteri e funghi, chemoattrattore.  -globuline Ig G-A-M-D-EAnticorpi. Picco monoclonale nel mieloma. Aumento policlonale nelle infezioni/infiammaz. croniche

14 Alcuni profili elettroforetici tipici

15 Principali enzimi di interesse diagnostico presenti nel siero EnzimaPatologiaValori di riferimento Fosfatasi acida (ACP) pH 5 Carcinoma prostatico (ACP tartrato-sensibile) 2.5-12 U/L (m) 0.2-5 T.S. 0.3-9 U/L (f) Alanina transaminasi (ALT o GPT) Danno epatocellulare (+ specif. della AST) enzima citosolico 5-35 U/L Fosfatasi alcalina (ALP) pH 9-10 Danno epatobiliare ostruttivo, danno osseo (riparaz. fratture, accrescimento, osteosarcoma) 30-90 U/L Amilasi (AMS)Pancreatite acuta; parotite90-280 U/L Aspartico transaminasi (AST o GOT) Danno epatocellulare o muscolare (cardiaco!); enzima mitocondriale 5-35 U/L AST/ALT<1 epatite acuta AST/ALT>1 cirrosi (alcolica)

16 Creatina cinasi (CK) Isoenzimi: CK-MM, -MB, BB Danno muscolare (trauma, distrofia)/miocardio/cereb rale 15-160 U/L  -glutamil transferasi (GGT) Patologie epatobiliari ostruttive; alcolismo; pancreatite 5-30 U/L Lattico deidrogenasi (LDH) Isoenzimi: LDH-1  5 Infarto miocardio, danno epatocellulare, carcinoma L  P 100-225 U/L P  L 80-280 U/L Lipasi (LPS)Pancreatite acuta0-1 U/L

17 Isoenzimi di interesse diagnostico IsoenzimaTessutoPatologia CK-MMCuore e muscolo schel.Infarto mioc.; traumi muscol CK-MBCuore e muscolo schel.Infarto mioc.; distrofia muscol CK-BB Separaz. Elettroforetica; RIA CervelloAccidenti cerebrovascolari, shock, tumori cerebrali LDH-1Cuore; RBC (emolisi rende campione inidoneo!) Infarto mioc.; emolisi (LD1>LD2) LDH-2 (norm. maggioritario)ReneInfarto renale LDH-3Polmone, linfociti, pancreasDanno polmonare (embolia, polmonite), linfocitosi, pancreatite LDH-4 e -5 Separaz. Elettroforetica Fegato e muscoloDanno epatocell./muscolare