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La“Pribnow box” nei promotori di E.coli
fd ..TGCTTCTGACTATAATAGACAGGGTAAAGACCTGATTTTTGA T7 A3 AAGTAAACACGGTACGATGTACCACATGAAACGACAGTGAGTCA T7 A2 AGTAACATGCAGTAAGATACAAATCGCTAGGTAACACTAGCAG. Lac-UV- 5 GCTTCCGGCTCGTATAATGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAA. l P ACCTCTGGCGGTGATAATGGTTGCATGTACTAAGGAGGTTG... R l P L ACCACTGGCGGTGATACTGAGCACATCAGCAGGACGCACTGAC. Tyr tRNA ..CGTCATTTGATATGATGCGCCCCGCTTCCCGATAAGGGAGCA Lac w.t. GCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAA. Consenso -10 T80A95T45A60A50T96 5-9 bp A/G T82T84G78A65C54A45 Consenso -35
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Il promotore di E.coli è costituito da tre componenti:
le sequenze consenso -35 e -10, e il sito d’inizio TATAAT TTGACA 5-9 basi 16-19 basi -10 -35 Sequenza -35 Pribnow box Sito di inizio della trascrizione +1
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Esperimento di “foot printing”
Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Promotori procariotici
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Regolazione della trascrizione
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Fattori Sigma di E.coli
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Vari fattori Sigma regolano le fasi d’infezione del fago SPO1
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Fattori trans-agenti Elementi cis-agenti
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Struttura dell’operone
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Controllo negativo Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Controllo positivo
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Controllo negativo e positivo
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Metabolismo del lattosio
Glucosio Galattosio Legame b-galattosidico b-galattosidasi
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Sequenza del promotore lac
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Operone lattosio
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Operone triptofano
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Figura 10.17 L’operone triptofano.
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Controllo negativo
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Controllo positivo
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Operone arabinosio di E.coli (controllo positivo)
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Operone arabinosio
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Proteina CAP (CRP)
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CAP interagisce con la polimerasi
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Regolazione positiva NtrC è un regolatore positivo che non agisce tramite "reclutamento" ma tramite modificazione allosterica della polimerasi
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Tipi di regolazione Corepressore Corepressore
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Regolazione dell'operone lattosio
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