Come si studia il DNA.

Presentazione sul tema: "Come si studia il DNA."— Transcript della presentazione:

1 Come si studia il DNA

2 Estrazione DNA Cellule/tessuti
Incubare a 56°C in presenza di proteasi, RNA-asi e detergente Trattare con fenolo/cloroformio Infine, la fase acquosa contenente il DNA viene trattata con etanolo per precipitare il DNA

3 Taglio del DNA: gli enzimi di restrizione, potenti forbici molecolari

4 Gli enzimi di restrizione
Gli enzimi di restrizione (detti anche endonucleasi di restrizione) si legano al DNA in corrispondenza di specifiche sequenze e tagliano un filamento di DNA in un punto e l’altro filamento in un punto differente, così che si formano 2 estremità “appiccicose” che permetteranno il successivo riappaiamento EcoRI, uno dei tanti enzimi di restrizione ottenuto da Escherichia coli

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6 PCR: Polymerase Chain Reaction
Kary Mullis Premio Nobel per la Chimica nel 1993     Polymerase Chain Reaction The PCR method – a copying machine for DNA molecules

7 1) Stampo di DNA 2) Denaturazione a 95°C

8 3) Aggiunta dei primer 17-24 bp, temperatura 50-60°C
4) Sintesi di DNA nuovo: 72°C, TaqPOL e NTP

9 Si ripetono i cicli 30-35 volte

10 Elettroforesi

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