UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI PALERMO FACOLTA’ DI FARMACIA

Presentazione sul tema: "UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI PALERMO FACOLTA’ DI FARMACIA"— Transcript della presentazione:

1 UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI PALERMO FACOLTA’ DI FARMACIA
DOTTORATO DI RICERCA IN SCIENZE FARMACEUTICHE XXIII CICLO Il fitochimico indicaxantina previene stress ossidativo, arresto del ciclo cellulare ed apoptosi indotta da 7-ketocolesterolo in monociti-macrofagi umani in coltura Coordinatore del dottorato: Prof. Girolamo Cirrincione Tutor: Dr. Carla Gentile Dottorando: Alessandro Attanzio

2 SCOPO DELLA RICERCA Valutazione della capacità dell’indicaxantina a prevenire gli effetti pro-ossidanti e pro-apoptotici indotti da 7-KC in cellule THP1-macrofagi umani in coltura

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5 Attività Riducente/Antiossidante Antiinfiammatoria

6 Approccio sperimentale
Vitalità cellulare Apoptosi: Studio della morfologia cellulare mediante microscopia a fluorescenza Analisi citofluorimetrica dell’esternalizzazione di PS Analisi citofluorimetrica del ΔΨm mitocondriale Analisi citofluorimetrica del ciclo cellulare Stress ossidativo endocellulare: Analisi citofluorimetrica dei ROS/RNS intracellulari Analisi spettrofotometrica dei tioli cellulari Analisi citofluorimetrica del Ca+2 intracellulare

7 Studio della vitalità cellulare
I valori che non presentano la stessa lettera sono significativamente differenti (P <0.05, Fisher’s test). I risultati sono la media ± SD di tre esperimenti indipendenti condotti in triplicato.

8 Valutazione della morfologia cellulare mediante AO/EB staining

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10 AnnexinV-FITC staining

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12 Analisi citofluorimetrica del ciclo cellulare

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14 DiOC6 staining: valutazione del m mitocondriale

15 ROS

16 Analisi citofluorimetrica dei livelli intracellulari di ROS/RNS
Analisi spettrofotometrica dei tioli intracellulari

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18 Fluo-3 AM staining: misura dei livelli di Ca+2 intracellulare

19 CONCLUSIONI

20 GRAZIE!