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Dottoranda Elena Giolo 30 marzo 2004
INIEZIONE INTRACITOPLASMATICA DI SPERMATOZOI TESTICOLARI CRIOCONSERVATI Dottoranda Elena Giolo 30 marzo 2004
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1978 nascita del primo essere umano dopo fecondazione in vitro
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FIVET Permette di ottenere un concepimento in presenza di compromissione funzionale e strutturale delle tube.
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ICSI Permette di risolvere condizioni di sterilità maschili gravi
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NEL 2% DELLE COPPIE INFERTILI IL PARTNER MASCHILE E’ AZOOSPERMICO
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AZOOSPERMIA OSTRUTTIVA
assenza o occlusione dei vasi deferenti; fallimenti di ricanalizzazione dopo sterilizzazione volontaria; eiaculazione retrograda incapacità all’erezione o all’eiaculazione;
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Aspirazione di spermatozoi dall’epididimo
MESA Aspirazione di spermatozoi dall’epididimo
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MESA
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Biopsia di tessuto testicolare
TESE Biopsia di tessuto testicolare
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AZOOSPERMIA NON OSTRUTTIVA
Difetto severo della spermatogenesi
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CRIOCONSERVAZIONE DEGLI SPERMATOZOI
Permette di evitare un’inutile stimolazione della partner in caso di mancato recupero; Permette di evitare biopsie ripetute a ogni ciclo ICSI;
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DECORONIZZAZIONE OVOCITI
Valutazione maturità e morfologia citoplasmatica Facilitazione procedure di micromanipolazione
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Micropipette con diametro di 140micron
Hyaluronidase 80UI Micropipette con diametro di 140micron
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Presenza del primo globulo polare
OVOCITI MATURI Presenza del primo globulo polare
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Micropipetta da iniezione diametro 5-7micron
Micropipetta Holding diametro 10-20micron
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Presenza di due pronuclei Presenza di due globuli polari
OVOCITA FERTILIZZATO Presenza di due pronuclei Presenza di due globuli polari
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Zigote
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Embrione a 4 cellule Embrione a 2 cellule
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Embrione a 8 cellule
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Blastocisti
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12 cicli ICSI: spermatozoi
239 cicli ICSI: liquido seminale 5 cicli ICSI: liquido seminale crioconservato 12 cicli ICSI: spermatozoi testicolari
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Table I. Fertilization, embryo development and clinical outcome after intracytoplasmic sperm injection with cryopreserved testicular spermatozoa Patient/cycle No. of oocytes Injected MII oocytes 2PN oocytes Thawed viable oocytes 2–4 cell embryos day 2 6–8 cell embryos day 3 Embryos transferred Clinical pregnancies 26 311 236 150 23 114 76 64 8 % 76 64 84 56 33 Mean 12 9 5.7 4.3 3.1 2.6 ± SD ± 7.6 ± 4.8 ± 2.6 ± 2.2 ± 1.5 ± O.7 Gianaroli L. et al., Hum Reprod. 1999
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Risultati della ICSI da TESE in pazienti azoospermici
Totali (%) Freschi Crioconservati N° biopsie testicolari effettuate 7 2 5 Numero cicli effettuati 12 10 Ovociti recuperati 81 18 62 Ovociti maturi iniettati 67 (83) 15 (83) 52 (84) Ovociti fertilizzati 34 (51) 4 (26) 30 (57) Embrioni ottenuti 26 (76) 4 (100) 22 (73) Embryo transfer effettuati 8 (66) 1 (50) 7 (70) Embrioni trasferiti 18 (69) 3 (75) 15 (68) Gravidanze ottenute 2 (25) 2 (28)
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Risultati della ICSI con liquido seminale eiaculato
% cicli effettuati 239 ovociti recuperati 1708 ovociti maturi iniettati 1392 81 ovociti fertilizzati 980 70 embrioni ottenuti 596 61 embryo transfer effettuati 217 93 embrioni trasferiti 496 83 gravidanze ottenute 45 21
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SVILUPPO EMBRIONALE
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GRAVIDANZE
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Spermatozoi eiaculati Spermatozoi eiaculati crioconservati
(%) Spermatozoi eiaculati crioconservati Tese cicli effettuati 234 5 12 ovociti maturi iniettati 1392 31 67 ovociti fertilizzati 980 (70) 17 (55) 34 (51) embrioni ottenuti 596 (61) 15 (88) 26 (76) embryo transfer effettuati 217 (93) 5 (100) 8 (66) embrioni trasferiti 496 (83) 12 (80) 18 (69) gravidanze ottenute 45 (21) 2 (40) 2 (25)
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CONCLUSIONE Crioconservazione degli spermatozoi testicolari, come tecnica efficace per evitare biopsie ripetute
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Per molte coppie avere dei figli propri è estremamente importante e l’introduzione di queste nuove tecniche ha dato questa possibilità anche ai pazienti azoospermici.
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