I test di laboratorio E. Seregni

Presentazione sul tema: "I test di laboratorio E. Seregni"— Transcript della presentazione:

1 I test di laboratorio E. Seregni
S.S. Terapia Medico-Nucleare ed Endocrinologia “Inquadramento diagnostico e approccio terapeutico dei tumori neuroendocrini” Milano, 25 maggio 2007 I test di laboratorio

2 Diagnostica di laboratorio
Marcatori specifici di istotipo Marcatori generici di neuroendocrinia Cellule EC di una cripta del Lieberkuhn

3 Marcatori specifici di istotipo
Carcinoide intestinale serotonina e metaboliti Gastrinoma gastrina, secrezione acida gastrica Insulinoma insulina, glucosio plasmatico VIPoma VIP, elettroliti plasmatici Glucagonoma glucagone, glucosio plasmatico Somatostatinoma somatostatina, glucosio, cloro Carcinoma midollare tiroide hCT, CEA Tumori linea simpatico-adrenergica Catecolamine e metaboliti

4 Biosintesi e metabolismo della serotonina

5 Valutazione escrezione urinaria giornaliera dell’acido 5’ idrossi-indol acetico (5’HIAA)
Carcinomi neuroendocrini del “midgut” (duodeno, digiuno-ileo, appendice, colon dx) a cellule EC Sindrome da “carcinoide tipica” Dosaggio HPLC Dieta priva di:

6 Paziente portatore di localizzazioni epatiche e polmonari da carcinoma neuroendocrino del tenue
TC torace 5’HIAA urine 24 ore: 45 mg (vn < 10 mg) TC fegato 111In-pentetreotide

7 Biosintesi e metabolismo delle catecolamine

8 Paraganglioma mediastinico in paziente sottoposto a RT metabolica con 131I-mIBG
TC torace 131I-mIBG 131I-mIBG 131I-mIBG 131I-mIBG

9 Paraganglioma addominale paravertebrale in paziente sottoposto a RT metabolica con 131I-mIBG
Noradrenalina urine 24 ore: 63 mg (vn < 85 mg) Adrenalina urine 24 ore: 13 mg (vn < 20 mg) Metanefrina plasmatica: 85 pg/mL (vn < 140 pg/mL) Normetanefrina plasmatica: 280 pg/mL (vn < 200 pg/mL) 131I-mIBG

10 Marcatori generici di neuroendocrinia
Enolasi Neurone-Specifica (NSE) Polipeptide Pancreatico (PP) Cromogranina A

11 Cromogranina A: distribuzione cellulare
E’ contenuta nei “dense-core secretory granules” delle cellule nervose, endocrine e neuroendocrine insieme a: ormoni peptidici ammine biogene neurotrasmettitori nucleotidi, calcio

12 Distribuzione tissutale delle cromogranine-secretogranine
Cellule del sistema nervoso centrale e periferico neuroni del cervelletto, corteccia, setto, amigdala, astrociti (?), retina, glomo carotideo, aortico etc. Cellule endocrine midollare surrene, adenoipofisi, tratto GEP, bronchi, paratiroidi, cellule C Cellule a differenziazione nuroendocrina prostata, mammella

13 La famiglia delle Cromogranine-Secretogranine
Cromogranina A Cromogranina B Secretogranina II (Cromogranina C) Secretogranina III (1B1075) Secretogranina IV (HISL-19) Secretogranina V (7B2) Secretogranina VI (NESP55)

14 Cromogranina A SS NH2- -COOH CgA: glicoproteina a singola catena di 439 amminoacidi con peso molecolare di kDa (glicosilazione, solfatazione) Estremità N-terminale: ponte S-S e sequenza Arg-Gly-Asp (RGD) coinvolta nel trasporto intracellulare Elevato contenuto di acido glutammico e capacità di legare ioni calcio Presenza di residui di-basici siti per idrolisi specifiche (endopeptidasi, carbossipeptidasi E/H)

15 Protozoi: Paramecium tetraurelia
Nematodi: Ascaris suum Teleosti: Danio rerio Uccelli: Coturnix japonica Anfibi: Rana ridibunda Rettili: Lacerta viridis Mammiferi: ratto, maiale, uomo

16 Azioni biologiche della CgA
Granulogenesi Pro-ormone

17 Ruolo della CgA nella secrezione regolata
Pompa protonica ATP-asi di tipo vacuolare Aggregazione e precipitazione sostenute da elevato Ca++ e basso pH Granulogenesi

18 Peptide-Encoding Regions and Putative Functional Domains of Human Chromogranin A (CgA)
Figure 3. Peptide-Encoding Regions and Putative Functional Domains of Human Chromogranin A (CgA). Arabic numbers designate amino acids in the mature protein (minus signal peptide). Roman numerals designate exon numbers. The intron-exon structure is not drawn to scale. Taupenot, L. et al. N Engl J Med 2003;348:

19

20 Azioni biologiche della pancreastatina (CgA 240-288)
Inibizione secrezione di insulina Riduzione uptake muscolare di glucosio Stimolazione glicogenolisi epatica Inibizione secrezione amilasi pancreatica Inibizione secrezione acida cellule parietali gastriche Inibizione secrezione di PTH } Iperglicemia

21 Autocrine-Paracrine Regulation of Catecholamine Release from Sympathoadrenal Chromaffin Cells by Catestatin Figure 4. Autocrine-Paracrine Regulation of Catecholamine Release from Sympathoadrenal Chromaffin Cells by Catestatin. The physiologic secretagogue acetylcholine binds to the agonist pocket on the nicotinic cholinergic receptor, triggering sodium influx and consequent membrane depolarization, which activates calcium influx through voltage-gated channels and leads to exocytotic release of the chromaffin-granule cargo. After the cargo has been released, catestatin exerts potent antagonistic effects on nicotinic cholinergic signaling, resulting in negative-feedback modulation of catecholamine release. Arrows with plus signs indicate stimulation, and the arrow with a minus sign inhibition. Taupenot, L. et al. N Engl J Med 2003;348:

22 Confocal microscopy studies showing co-localization of BNP and CgA granules in the cytoplasm of a myocyte Pieroni, M. et al. Eur Heart J :

23 Utilizzo clinico del dosaggio della CgA tumori neuroendocrini GEP
inquadramento diagnostico significato prognostico sorveglianza follow-up monitoraggio terapie

24 Sensibilità diagnostica dei marcatori in pazienti affetti da neoplasie neuroendocrine GEP (106 pazienti) Valori di cut-off : NSE: 12 ng/mL; CEA: 5 ng/mL; 5’HIAA: 10 mg/urine 24 ore

25 Sensibilità della CgA in pazienti con tumori neuroendocrini del tratto GEP in funzione dell’estensione della neoplasia

26 Modificazioni della CgA in corso di terapia in pazienti con metastasi epatiche da tumori neuroendocrini GEP SD stable disease; CR complete response; PR partial response; PD progressive disease Test chi-quadro (p= )

27 Andamento della CgA circolante nel follow-up di un paziente con carcinoma neuroendocrino renale e trattato con 5 cicli di RT metabolica di 111In-pentatreotide 111In-pentetrotide

28 Campana D et al, J Clin Oncol 2007
Distribuzione dei valori di CgA in pazienti portatori di tumori neuroendocrini del tratto GEP, gastrite cronica atrofica e in soggetti sani Campana D et al, J Clin Oncol 2007

29 Utilizzo clinico del dosaggio della CgA feocromocitoma/paraganglioma
E. Grossrubatscher et al. Clin Endocrinol., 2006 131I-mIBG Paziente portatore di feocromocitoma (Cys634Tyr) CgA 155 ng/mL Fondazione IRCCS Istituto Tumori Milano Inquadramento incidentalomi surrenalici Monitoraggio delle forme famigliari Valutazione della radicalità chirugica Sorveglianza del follow-up Valutazione della risposta ai trattamenti

30 Metodi di dosaggio della CgA
Metodo ELISA DAKO A/S (Glostrup, Denmark) Anticorpi policlonali contro il frammento C-terminale di 23 kDa Concentrazioni espresse in U/L Valore soglia 37 U/L Metodo IRMA CIS Bio Intern (Gif sur Yvette, France) Anticorpi monoclonali contro epitopi nella regione Concentrazioni espresse in ng/mL Valore soglia 100 ng/mL

31 Sensibilità e specificità clinica di due metodi dosaggio della CgA in neoplasie neuroendocrine

32 Concentrazioni di CgA1-17, CgA , CgA in 10 pazienti con carcinoide (C) e tumore endocrino del pancreas (E) Stridsberg M et al, 2004

33 Cause non tumorali di innalzamento della CgA
Gravidanza Ipertensione essenziale Insufficienza renale Insufficienza epatica Insufficienza cardiaca Malattie neuro-degenerative Malattia di Parkinson Trattamenti farmacologici Inibitori pompa protonica Anti-ipertensivi

34 Effetto del trattamento con omeprazolo su i livelli sierici di CgA
(42 pazienti; omeprazolo 10 mg/die per 5-90 gg.) Giusti M et al, 2004