Università degli Studi di Messina DIPARTIMENTO SPECIALITA’ CHIRURGICHE CLINICA OCULISTICA Direttore: Prof. G. Ferreri Espressione genica di Metalloproteinasi 9 e Transglutaminasi 2 nella congiuntiva di pazienti affetti da occhio secco Aragona P, Aguennouz M, Spinella R, Crupi R, Rania L, Vita G, Mobrici M, Lorino F

Non esiste una univoca interpretazione del ruolo dell’infiammazione nella patogenesi delle diverse forme di dry eye Vengono spesso ricercati markers infiammatori per valutare la compromissione della superficie oculare nei vari processi patologici Sempre più spesso vengono indicate molecole anti-infiammatorie per la terapia del dry eye

Transglutaminasi 2 Responsabile, nella guarigione delle ferite, del cross-linking proteico mediante il legame di amine primarie a residui di glutamina sulla molecola proteica (Griffin M et al. Biochem J 2002) Aumenta la metabolizzazione della Fosfolipasi A2 con conseguente liberazione di eicosanoidi pro-infiammatori (Miele L. J Clin Invest 2003) La disregolazione di questa attività enzimatica è stata descritta nel wound healing patologico nella LASIK ed in malattie neurodegenerative, neoplastiche, autoimmuni, caratterizzate da fibrosi tissutale (Nishida K et al. Am J Pathol 1999; Priglinger SG et al. J Cataract Ref Sur 2005)

MMP9 Gelatinasi B, che agisce modificando o degradando la matrice extracellulare (Li DQ, et al. Arch Ophthalmol 2001) Lisa componenti della membrana basale e delle Tight Junctions dell’epitelio, alterando la barriera epiteliale (Luo L et al. IOVS 2004) Ha un ruolo fisiologico nella desquamazione e nel ricambio cellulare (Sternlicht MD et al. Annu Rev Cell Dev Biol 2001; Behzadian MA, et al. IOVS 2001) Nel dry eye è aumentata nelle lacrime per l’accentuato stimolo al ricambio cellulare (erosioni epiteliali) (Pflugfelder S, et al. IOVS ARVO-Abs 2002)

Materiale e Metodo Gruppo 1: 10 pz. Sjogren primaria (10 F) età 61,6±13,6 Gruppo 2: 10 pz. affetti da blefarite (10 F) età 55,2±10 Gruppo 3: 5 soggetti normali (5 F) età 45,2±15,7 Score Sintomatologico, BUT, Colorazione Corneale con Fluoresceina, Colorazione Congiuntivale con Verde di Lissamina, Test di Schirmer I. Prelievo citologico della congiuntiva per imprinting ad ore 12 (filtri Supor 200, Gelman, Francia) Real time PCR per studio TGM2 e MMP9 Statistica: Student’s T-test; Mann-Whitney U-test. Dati dell’occhio destro.

Real-time PCR La RT-PCR valuta il contenuto di mRNA che codifica per un determinato gene e rileva quantità molto piccole di RNA La Real-time RT-PCR quantifica l’espressione di geni in modo più specifico, sensibile e riproducibile rispetto ad altre forme di RT-PCR

Sjogren Blefarite Controlli Sintomi BUT Cornea Lissamin Schirmer TGM2 MMP9 Sjogren 8±3,1a 26±0,9b 4,3±4,3d 3,6±2,5e 11,2±11,2f 33,7±15,7g 22,5±7,6j Blefarite 8±1.1a 4,2±1,7c 1,2±0,9d 2±1,8 26,7±12,7 7,7±6h 12±3,7k Controlli 12±3,2 0.9±0,2 28±13,4 1,98±0,02 0,98±0,02 a=p<0,001 vs controlli; b=p<0,001 vs blefariti e controlli; c=p<0,001 vs controlli; d=p<0,01 vs controlli; e=p=0,003 vs controlli; f=p<0,001 vs blefariti e controlli; g=p<0,0001 vs blefariti e controlli; h=p=0,05 vs controlli; j=p<0,001 vs blefariti e controlli; k=p=0,0009 vs controlli

CONCLUSIONE Esiste una differente espressione dei markers infiammatori TGM2 e MMP9 nelle diverse forme di dry eye L’espressione di TGM2 e MMP9 è maggiore nella congiuntiva di pz Sjögren che in quelli affetti da blefarite Il trattamento di queste patologie deve tener conto del diverso livello di infiammazione esistente per un corretto approccio terapeutico