Plasmidi Elementi genetici accessori, extracromosomici Anelli di ADN Codificano per fattori di coniugazione, di virulenza, di patogenicità, di resistenza ad antibiotici, … Presenti in molte copie

Plasmidi

Coniugazione Rivederla, nel corso di genetica

Corpi inclusi Materiale di riserva, polimerico [p.e. poli-idrossi-butirrato, o glicogeno…] Dipendono dalle condizioni ambientali A volte metacromatici Interesse diagnostico [Corynebacterium diphteriae]

11 novembre 2008 I caratteri microscopici Prof. P. Urbano per CL in  Fisioterapia – Firenze Accorpati: CL in Ostetricia CL in Dietistica

Metodi di studio in microbiologia Tradizionali visualizzazione  microscopia  forma, dimensioni, disposizione, caratteristiche tintoriali (Gram, Alcool-Acido-resistenza, metacromasia, …) coltivazione, terreni artificiali in vitro agarizzati  colonie  coltura pura brodi  sospensione cellulare in vivo (animali da esperimento, colture cellulari) analisi antigene Innovativi metodiche biomolecolari analisi proteine, lipidi, acidi nucleici…

Batteri – colorazione di Gram Gram pos blu-violetto --- Gram neg rossi

Micrometro oculare The ocular micrometers provided are calibrated so that when using 1000X oil immersion microscopy, the distance between any two lines on the scale represents a length of approximately one micrometer. Remember this does not hold true when using other magnifications.

Forma e disposizione

Piani di divisione e disposizione

Il metodo di Burri evidenzia le capsule

Colorazioni differenziali per le spore - Malachite green stain is forced into the spore by heating the cells. - Vegetative cells are then decolorized with water and stained pink with safranin counterstain. Colorazione di Albert

Corynebacteria Corynebacteria are Gram-positive, aerobic, nonmotile bacilli. Polyphosphate inclusion bodies, metachromatic granules, make the bacteria appear "barred. Corynebacteria have a characteristic "Chinese-letter" arrangement of cells due to their snapping movements after cell division.

Disposizione ciglia

Caratteri macroscopici Si apprezzano a occhio nudo [o vengono rilevati con automatismi vari]

È preliminare a ogni studio fenotipico Isolamento in piastra È preliminare a ogni studio fenotipico

Apprezzamento dello sviluppo in terreni liquidi A sinistra brodo bile verde brillante privo di crescita, a destra lo stesso substrato con torbidità e produzione di gas Intorbidamento, viraggio di colore, formazione di gas, …

Apprezzamento dello sviluppo in terreni liquidi Litmus milk (latte tornasolato) con diverse manifestazioni della crescita: coagulazione e alcalinizzazione superficiale, proteolisi, coagulazione acida

Apprezzamento dello sviluppo in terreni liquidi Brodo all’urea con variazione del colore del substrato in seguito a viraggio dell’indicatore per produzione di ammoniaca dall’urea

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (slant) Un microrganismo che produce pigmenti extracellulari (Monascus purpureus, una muffa)

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (slant) a sinistra tre slant di muffe: Rhizopus, con crescita molto fioccosa, Penicillium e Aspergillus con aspetto polverulento e conidi colorati; a destra batteri su slant, notare l’aspetto umido della patina di crescita

Agar TSI [triplo zucchero, ferro] C.freundii Sterile E.coli M.morgani P.mirabilis Pseudomonas

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (piastre Petri) a sinistra colonie di muffe su Rose Bengal Chloramphenicol Agar, un substrato selettivo per muffe e lieviti e su Malt Extract agar: notare l’aspetto fioccoso/porverulento delle colonie. A destra colonie di S. cerevisiae sullo stesso substrato; le colonie hanno un aspetto ceroso.

Caput medusae (B. anthracis)

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (piastre Petri) colonie di batteri su Plate Count Agar Standard (un substrato per la determinazione del tenore in germi in prodotti alimentari); notare le differenze in forma, dimensione e colorazione delle colonie, che hanno comunque un aspetto più umido di quelle di muffe e lieviti

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (piastre Petri) colonie di Janthinobacterium lividum (un microrganismo pigmentato) su vari substrati lieviti

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (piastre Petri) colonie di batteri su MRS ipersaccarosato: i produttori di destrano (up esopolisaccaride capsulare a sintesi extracellulare) formano colonie molto grandi, mucoidi, trasparenti

Apprezzamento dello sviluppo su terreni solidi (piastre Petri) colonie di batteri su substrati differenziali e/o selettivi: in alto a sinistra E. faecalis su Agar Barnes: le colonie sono rosse per riduzione del cloruro di trifeniltetrazolio; in alto a destra colonie di stafilococchi su Baird-Parker: notare il colore nero (riduzione del potassio tellurito) e la presenza di aloni di chiarificazione e/o precipitazione del rosso d’uovo intorno ad alcune colonie

Miniaturizzazione: l’ Enterotube®

Inoculazione dell’ Enterotube®

Miniaturizzazione: API strips The API identification products comprise strips, generally containing 20 miniature biochemical tests, and databases.

Miniaturizzazione e automazione: Bactometer Misure di impedenza in microcelle

Automazione The Sensititre ARIS® is a fully automatic, bench-top incubating and reading system that reduces workload and speeds the laboratory routine. ARIS® fits onto the AutoReader and uses an internal barcode scanner to identify each plate type, assign the appropriate incubation time, and when this assigned time has elapsed, transport the plate to the AutoReader for fluorescence measurement – with no manual intervention.

WALKAWAY 40 AUTOMATED MICROBIOLOGY SYSTEM