PLASMA UMANO COME SUPPORTO PER LA GENERAZIONE DI PELLE AUTOLOGA

devono possedere le seguenti caratteristiche: tollerabilità: devono essere immunologicamente inerti (biocompatibili) impalcatura provvisoria: dopo integrazione il biomateriale deve essere sostituito dal tessuto originario (biodegradabili) contenuto informativo: devono comunicare e scambiare segnali con le cellule ospite BIOMATERIALI

LE MATRICI PIU’ IDONEE.. Per la crescita e differenziazione di cheratinociti e fibroblasti autologhi, le matrici più idonee, sono di tipo naturale e si suddividono in: - collagene - agarosio - acido ialuronico - colla di fibrina - PGA - PHBV - PEG Grande interesse è rivolto verso l’utilizzo del plasma umano come supporto di crescita per cheratinociti e fibroblasti

“Human plasma as a dermal scaffold for the generation of a completely autologous bioengineered skin” Llames SGLlames SG, Del Rio M, Larcher F, García E, García M, Escamez MJ, Jorcano JL, Holguín P, Meana A.Del Rio MLarcher FGarcía EGarcía MEscamez MJJorcano JLHolguín PMeana A Centro Comunitario de Sangre y Tejidos del Principado de Asturias, Emilio Rodriguez Vigil s/n, Oviedo,Spain. Plasma umano come supporto tridimensionale per la crescita di fibroblasti e cheratinociti

MATERIALI E METODI Estrazione e amplificazione di cheratinociti e fibroblasti umani autologhi, prelevati da un’unica biopsia Preparazione del supporto di plasma - 7,2 ml plasma umano - 7,2 mg acido tranexamico - 8,8 ml NaCl 0,9% - 2 ml CaCl 2 Aggiunta di fibroblasti e cheratinociti a diverse densità

Densità di semina fibroblasti 2X10 3 /cm 2 4X10 3 /cm 2 6X10 3 /cm 2 Densità di semina cheratinociti 8X10 4 /cm 2 15X10 4 /cm 2

t0t0 FIBROBLASTICHERATINOCITI t 1 (dopo 4 giorni) - CHERATINOCITI t 2 (dopo 8 giorni) - CHERATINOCITI MODALITA’ SEMINA Dopo 13 giorni i frammenti vengono prelevati per l’esame istologico

microscopio a contrasto di fase dopo 3 giorni

microscopio a contrasto di fase dopo 8 giorni

ematossilina-eosina

immunoistochimica: vimentina

immunoistochimica: citocheratine

immunoistochimica: MIB1

SVANTAGGIVANTAGGI Supporto fragile e poco maneggevole Permette di ottenere innesti del tutto autologhi Crescita di cheratinociti scarsa