Corso integrato Medicina di Laboratorio Microbiologia Clinica

Presentazione sul tema: "Corso integrato Medicina di Laboratorio Microbiologia Clinica"— Transcript della presentazione:

1 Corso integrato Medicina di Laboratorio Microbiologia Clinica
UNIVERSITA' degli STUDI di PERUGIA/TERNI  Corso di Laurea in Medicina e Chirurgia Corso integrato Medicina di Laboratorio Microbiologia Clinica Vaginite e Vaginosi

2 prurito, bruciore e perdite maleodoranti
VAGINITE La vaginite è una condizione infiammatoria a carico della vagina, a volte estesa anche alla vulva, caratterizzata principalmente da prurito, bruciore e perdite maleodoranti Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Am Fam Physician. 2011;83(7):

3 VAGINITE: quadri più frequenti
Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Candidiasi Trichomoniasi Vaginite aerobia Vaginite mista Altri Am Fam Physician. 2011;83(7):

4 VAGINITE: quadri meno frequenti
Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Vaginosi citolitica Vaginite in età prepubere Sindrome genito-urinaria della menopausa (vaginite atrofica) Vaginite da Herpes simplex Patogeni Streptococcus pyogenes Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Non patogeni/patogeni condizionali Escherichia coli Enterococcus faecalis Pseudomonas aeruginosa Sovracrescita lattobacillare Nuclei cellulari isolati Frammenti di cellule epiteliali Scarsità di leucociti, Assenza di lieviti/ife Prurito e bruciore vulvare, disuria, urgenza minzionale eritema, IVU ricorrenti Prurito e bruciore vulvare, ragadi, eritema, perdite A volte confusa con candidiasi vaginale Hu Z et al. J Low Genit Tract Dis. 2015 Apr;19(2):152-5. Kim HK et al. J Menopausal Med. 2015 Aug;21(2):65-71. Ashley RL et al. Clin Microbiol Rev. 1999 Jan;12(1):1-8. Bumbulienė Ž et al. J Postgrad Med J. 2014;90(1059):8-12.

5 VAGINOSI Condizione patologica a causa ignota, caratterizzata da deplezione della normale popolazione lattobacillare e sostituzione da parte di popolazione batterica mista, costituita principalmente da anaerobi (Mobiluncus spp., Bacteroides spp.,) e Gardnerella vaginalis Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Am Fam Physician. 2011;83(7):

6 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U.S.A.
Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis Aug;57(4):e22-e121.

7 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U.S.A.
Misurazione del pH 3,8-4,5: Normale/candidiasi > 4,5: Vaginosi, trichomoniasi, vaginite aerobia Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis Aug;57(4):e22-e121.

8 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U.S.A.
Esame microscopico a fresco Verifica idoneità prelievo (cellule epiteliali) Ricerca leucociti Ricerca Trichomonas vaginalis (forme mobili) Misurazione del pH 3,8-4,5: Normale/candidiasi > 4,5: Vaginosi, trichomoniasi, vaginite aerobia + KOH 10% Whiff test Ricerca lieviti/ife/pseudoife Negativo Coltura Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis Aug;57(4):e22-e121.

9 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U.S.A.
Esame microscopico dopo colorazione di Gram Nugent score Esame microscopico a fresco Verifica idoneità prelievo (cellule epiteliali) Ricerca leucociti Ricerca Trichomonas vaginalis (forme mobili) Misurazione del pH 3,8-4,5: Normale/candidiasi > 4,5: Vaginosi, trichomoniasi, vaginite aerobia + KOH 10% Whiff test Ricerca lieviti/ife/pseudoife Negativo Coltura Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis Aug;57(4):e22-e121.

10 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI
Raccolta dati anamnestici per verificare l'appropriatezza del prelievo La paziente: non deve avere avuto rapporti sessuali nelle 24 ore precedenti l’esame non deve essere in periodo mestruale non deve avere eseguito irrigazioni vaginali nelle 24 ore precedenti l’esame deve aver cessato qualsiasi terapia antimicotica o antibiotica, locale o generale, da almeno 7 giorni Indagini microbiologiche Primo livello Candida spp., Trichomonas vaginalis, vaginosi batterica Secondo livello HSV Altri microorganismi (anamnesi e clinica suggestive di altre cause) Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

11 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI
Misurazione del pH dalle pareti laterali mediante carta indicatrice/pHmetro Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

12 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI
Misurazione del pH dalle pareti laterali mediante carta indicatrice/pHmetro inserimento speculum bivalve sterile Prelievo dal fornice posteriore Tampone per whiff test con KOH 10% (vaginosi)  ricerca lieviti/ife/pseudoife Tampone per esame microscopico a fresco  (Trichomonas vaginalis) Tampone per esame microscopico dopo colorazione di Gram  (Nugent score) Tampone per eventuale coltura Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

13 VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI
Misurazione del pH dalle pareti laterali mediante carta indicatrice/pHmetro inserimento speculum bivalve sterile Prelievo dal fornice posteriore Tampone per whiff test con KOH 10% (vaginosi)  ricerca lieviti/ife/pseudoife Tampone per esame microscopico a fresco  (Trichomonas vaginalis) Tampone per esame microscopico dopo colorazione di Gram  (Nugent score) Tampone per eventuale coltura In caso di lesioni vulvari sospette per HSV Prelievo liquido da vescicole Prelievo da ulcere mediante scraping IF NAATs Coltura Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

14 CANDIDA Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

15 VAGINITE da Candida spp.
Infiammazione vulvovaginale associata al riscontro di lieviti, ife e pseudoife all’indagine microscopica Clinicamente caratterizzata soprattutto da intenso prurito, ma anche bruciore, dispareunia, disuria, edema ed eritema della mucosa, leucorrea e pH ≤4,5 Segni e sintomi non patognomonici Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

16 VAGINITE da Candida spp: approccio diagnostico secondo linee guida europee
Cuenca-Estrella M et al. Clin Microbiol Infect Dec;18 Suppl 7:9-18.

17 VAGINITE da Candida spp: approccio diagnostico secondo linee guida tedesche
Mendling W et al. Mycoses Mar;58 Suppl 1:1-15.

18 VAGINITE da Candida spp.: esame microscopico a fresco vs Gram
Gold standard: coltura Lieviti ed ife a 400x Lieviti ed ife a 1000x Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Abbott J. Ann Emerg Med May;25(5):

19 VAGINITE da Candida spp.: interpretazione clinica
dei test molecolari?

20 VAGINITE da Candida spp.: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia
Marzo Gennaio 2014 Prevalenza pazienti positive per miceti mediante coltura: 126/663 (19%) Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Leli et al. 2015; Unpublished data

21 VAGINITE da Candida spp.: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia
Marzo Gennaio 2014 Positività tampone vaginale per miceti in relazione alla presenza di sintomi di vaginite Sintomi di vaginite Tampone vaginale per miceti Presenti Assenti Positivo 78 (61,9%) 48 (38,1%) 126 Negativo 234 (43,6%) 303 (56,4%) 537 312 351 663 Differenza significativa: P<0,0001 Leli et al. 2015; Unpublished data

22 VAGINITE da Candida spp.: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia
Marzo Gennaio 2014 Prevalenza specie tra pazienti positive per miceti mediante coltura Leli et al. 2015; Unpublished data

23 VAGINITE da Candida spp.: epidemiologia altri centri italiani
Studio italiano multicentrico prospettico 8 centri, ambulatori di Ginecologia & Ostetricia 925 pazienti con segni/sintomi di vulvovaginiti Corsello S et al. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol Sep 10;110(1):66-72.

24 TRICHOMONAS VAGINALIS
Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

25 VAGINITE da Trichomonas vaginalis
Causa di vaginiti gravi con perdite schiumose giallo-verdastre e maleodoranti, accompagnate a volte da prurito vulvare, dispareunia, disuria Segni e sintomi non patognomonici Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

26 Esame microscopico a fresco
VAGINITE da T. vaginalis: approccio diagnostico secondo linee guida est Europa Consigliati Esame microscopico a fresco Metodi immunocromatografici (sensibilità e specificità superiori all’esame microscopico) NAATs Coltura (gold standard) Sconsigliati Esame microscopico dopo Gram/Giemsa/Blu di metilene (bassa sensibilità) Pap-Test (bassa sensibilità e specificità) Test sierologici non sono consigliati (bassa sensibilità e specificità) Domeika M et al. J Eur Acad Dermatol Venereol Oct;24(10):

27 VAGINITE da Trichomonas vaginalis: accuratezza diagnostica esame microscopico a fresco

28 VAGINITE da Trichomonas vaginalis:
point-of-care test vs esame microscopico a fresco Popolazione: 330 pazienti sintomatiche Gold standard: coltura (InPouch) Huppert JS et al. Clin Infect Dis Jul 15;45(2):194-8.

29 Prevalenza pazienti positive per Trichomonas vaginalis
VAGINITE da Trichomonas vaginalis: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia - Gennaio-Settembre 2015 Prevalenza pazienti positive per Trichomonas vaginalis mediante Real-Time PCR: 20/1569 (1,3%) Leli et al. 2015; Unpublished data

30 VAGINITE da Trichomonas vaginalis: accuratezza diagnostica PCR
Meta-analisi di 35 studi Gold standard: coltura (InPouch) Patel SR et al. Infect Dis Obstet Gynecol. 2000;8(5-6):

31 VAGINOSI Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

32 Mendling W et al. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2014 Jan;74(1):51-54.

33 VAGINOSI: Nugent score
Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Nugent RP et al. J Clin Microbiol Feb;29(2):

34 VAGINOSI: Nugent score
Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Nugent RP et al. J Clin Microbiol Feb;29(2):

35 VAGINOSI: accuratezza diagnostica dei criteri di Amsel
Popolazione: 120 pazienti con sintomatologia compatibile con vaginosi Gold standard: Nugent score Esame microscopico a fresco, 400x, Clue cells Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Mohammadzadeh F et al. Glob J Health Sci Oct 29;7(3):8-14.

36 VAGINOSI: significato clinico dei test molecolari?
In-house real-time PCR test: accuratezza diagnostica Popolazione: 151 pazienti Gold standard: Nugent score Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Kusters JG et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis Sep;34(9):

37 epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Gennaio-Settembre 2015
VAGINOSI: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Gennaio-Settembre 2015 Prevalenza pazienti positive per vaginosi Identificata mediante Gram: 148/1569 (9,4%) Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

38 VAGINITE AEROBIA Condizione infiammatoria caratterizzata da deplezione lattobacillare, intenso richiamo leucocitario e presenza di “leucociti tossici”, pH ≥6, presenza di cocchi Gram positivi, presenza di cellule parabasali Manifestazioni cliniche: prurito, dispareunia, perdite Segni e sintomi non patognomonici Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Donders GG et al. BJOG (1):34-43.

39 VAGINITE AEROBIA: epidemiologia internazionale
76/516 (14,7%) pazienti sintomatiche Fan AP et al. Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi Dec;45(12): 7,9% (50/631) pazienti sintomatiche/controllo dopo trattamento Donders GG et al. BJOG (1):34-43. 7/245 (2,9%) pazienti in gravidanza Gondo F et al. Gynecol Obstet Invest. 2011;71(3):