Enzimologia clinica.

Presentazione sul tema: "Enzimologia clinica."— Transcript della presentazione:

1 Enzimologia clinica

2 Scopo valutare la concentrazione degli enzimi nei fluidi corporei a fini diagnostici Enzimi: catalizzatori biologici  aumentano la velocità di una reazione senza essere consumati

3 Cinetica Enzimatica E + S ES EP E + P Enzimi a substrato singolo
Es. Amilasi, lipasi Enzimi a substrati multipli

4 Cinetica Enzimatica Free energy of activation uncatalyzed reactants
DG* reactants Free Energy Free Energy DGo products products Reaction Progress Free energy change

5 Velocità di reazione concentrazione di substrato
Influenzata da concentrazione di substrato concentrazione di enzima temperatura pH cofattori coenzimi attivatori inibitori

6 Legge di Michaelis-Menten
Basse concentrazioni  Reazione di primo ordine Alte concentrazioni  Reazione di ordine 0 Costante di Michaelis-Menten è la concentrazione di substrato che corrisponde ad una velocità di reazione pari al 50% del massimo

7 Enzimi: specificità di substrato

8 Localizzazione Enzimatica
Liberi nelle cellule di diversi tessuti ed organi Confinati in particolari strutture all’interno delle cellule stesse In un determinato tessuto od organo specifico  enzimi organo specifici

9 Gli enzimi nel sangue spesso non hanno un ruolo fisiologico
presenti anche in situazioni normali invecchiamento fisiologico turnover cellulare eliminati da sistema reticolo endoteliale Rene (es. amilasi) livello di attività normale nel siero è funzione di velocità di rilascio clearance emivita 2 ore (CK-BB) 170 ore (ALP placentare)

10 Aumento degli enzimi nel plasma:
necrosi o danno cellulare  citolisi  fuoriuscita enzimi Fattori tossici Ischemia aumentato turnover cellulare Accrescimento Rigenerazione cellulare Neoplasie Gravidanza Induzione enzimatica Farmaci (es. Fenobarbital, alcool) Patologie (es. colestasi) Ostruzione dei dotti escretori  enzimi presenti nelle secrezioni esocrine si trovano nel plasma

11 Liberazione enzimi nel circolo
la velocità di comparsa nel sangue dipende da passaggio nel sangue diretto attraverso il circolo linfatico localizzazione intracellulare citoplasmatica mitocondriale

12 Fluidi utilizzati siero sangue plasma orine liquor cefalorachidiano
versamenti fluidi extracellulari

13 usi patologie epatiche patologie cardiache patologie muscolari
patologie pancreatiche patologie ossee patologie autoimmuni patologie gastroenteriche neoplasie

14 Metodiche di analisi controllo di ed ottimizzazione di
pH temperatura concentrazione di substrato che permetta di ottenere una cinetica di grado 0 metodiche immunologiche

15 Metodiche di analisi Metodiche enzimatiche metodiche immunologiche
controllo di ed ottimizzazione di pH temperatura concentrazione di substrato che permetta di ottenere una cinetica di grado 0 metodiche immunologiche