ICSI E RISCHIO GENETICO

Correlato alla patologia sottostante Anomalie del cariotipo Anomalie cromosomiche degli spermatozoi Anomalie genetiche legate alla causa di sterilità: fibrosi cistica (azoospermia da assenza congenita dei deferenti) AZF (oligoazoospermia idiopatica).

Aberrazioni cromosomiche durante lo sviluppo prenatale (Plachot et al,1987) oociti spermatozoi 32% 8% oociti fertilizzati 37% embrioni pre-impianto 20,6% aborti I trimestre 8-10% nati 0,6%

Anomalie cromosomiche in pz oligospermici (cariotipo su sangue periferico) bibliografia numero conc cromosomi autosomi totale (mil/ml) sessuali Hendry et al (1976) 108 <20 1 (0,9) 1 (0,9) 2 (1,9) Micic et al (1984) 464 <20 - 8(1,7) 8(1,7) Retief et al (1984) 390 <10 14 (3,6) 10 (2,6) 24 (6,2) Bourrouillou et al (1985) 569 <10 11 (1,9) 28 (4,9) 39 (6,9) Matsuda et al (1989) 170 <20 2 (1,2) 4 (2,4) 6 (3,5) totale 1701 28 (1,6) 51 (3) 79 (4,6)

Anomalie cromosomiche in pz azoospermici (cariotipo su sangue periferico) bibliografia numero cromosomi autosomi totale sessuali Hendry et al (1976) 54 3 (5,6) 2 (3,7) 5 (9,2) Micic et al (1984) 356 28 (7,9) 2 (0,6) 30 (8,4) Retief et al (1984) 106 19 (1,9) - 19 (1,9) Bourrouillou et al (1985) 383 54 (14) 5 (1,3) 59 (15,4) Matsuda et al (1989) 89 5 (5,6) 2 (2,2) 7 (7,9) totale 1151 145 (2,6) 13 (1,1) 158 (13,7)

Traslocazioni ed inversioni in oligospermici

Traslocazioni ed inversioni in azoospermici

In presenza di cariotipo periferico alterato con: anomalie degli autosomi: traslocazioni Robertsoniane ( rischio di aborto, di anomalie congenite multiple e/o ritardo mentale) + effetto sulla spermatogenesi traslocazioni reciproche ( rischio di aborto, di anomalie congenite multiple e/o ritardo mentale) + effetto sulla spermatogenesi inversioni ( rischio di aborto, di anomalie congenite multiple e/o ritardo mentale) + effetto sulla spermatogenesi anomalie dei cromosomi sessuali: 47,XXY (Sindrome di Klinefelter: atrofia testicolare, vari livelli di deficit intellettivo) 46,XY/47,XXY (vari gradi di compromissione della spermatogenesi) anomalie strutturali: rischio sterilità (AZF)

In presenza di una anomalia del cariotipo è possibile consigliare una consulenza genetica durante la quale può essere valutato il rischio per il nascituro

Esiste, per queste coppie, un aumentato rischio? Nell’85-90 % dei casi il cariotipo periferico è normale Esiste, per queste coppie, un aumentato rischio?

Bernardini et al, 1997

Cytogenetic constitution of semen samples in a subset of patients using in-situ hybridization for autosomes 1 and 17. Groups C U O n=2 n=4 n=4 Cells/patients >3000 >3000 >3000 Disomy 1 (%) 0,4 0,38 0,54 Disomy 17 (%) 0,35 0,37 0,74 Diploidy 1 (%) 0,4 0,3 0,53 Total (%) 1,15 1,05 1,80* *P <0,001 Bernardini et al, 1999

Colombero et al, 1999

Pang et al, 1999

Double target hybridization of semen sample with byotinilated X probe (brown) and fluorescine isothiocyanate (FITC)-labelled Y probe (green). Bernardini et al, 1999

FISH on sperm nuclei (disomic sperm for chromosome 21, orange signals) FISH on lymphocyte chromosome Egozcue et al, 1997

DIAGNOSI PRENATALE ICSI (BRUXELLES) CVS (USA) diagnosi 977 56.952 alterazioni cromosomiche 15 / autosomiche 4 (0,4%) 0,14 % sessuali 8 (0,8%) 0,22% strutturali 3 (0,3%) 0,25% totali 15 (1,5%) 0,61% (Van Steirteghem et al, 1997)

AZF Tiepolo e Zuffardi, 1976: identificazione in 6 soggetti azoospermici di delezioni in una regione del braccio lungo del cromosoma Y (locus AZF “azoospermia factor”) Vogt et al, 1996,1997: identificazione di 3 regioni distinte AZFa, AZFb, AZFc 10-15% dei soggetti oligo-azoospermici idiopatici presenta microdelezioni in uno di questi loci Nessuna microdelezione è stata identificata nei soggetti fertili

Human Y chromosome with the sequenced-tagged sites (STS) Grimaldi et al, 1998

Assenza congenita dei dotti deferenti e fibrosi cistica 2% dei casi di azoospermia ostruttiva è legato ad assenza congenita dei deferenti (CBAVD) in presenza di CBAVD il 40% dei soggetti presenta mutazioni F508 rispetto al 4% della popolazione