Rischio riproduttivo (popolazione, familiari di malati) DIAGNOSTICA GENETICA Analisi cromosomica PRENATALE Ricerca di mutazioni puntiformi in singoli geni Medicina legale Rischio riproduttivo (popolazione, familiari di malati) POST NATALE Conferma di diagnosi Tumori Diagnosi predittiva Farmacogenetica

Problemi tecnici Problemi biologici Problemi etici

Le basi genetiche delle malattie Anomalie cromosomiche Malattie multifattoriali Malattie monogeniche nascita pubertà età adulta

Anomalie cromosomiche Identificabili dall’analisi del cariotipo

CARIOTIPO UMANO MASCHILE 46, XY 23 COPPIE CROMOSOMI: 22 COPPIE DI AUTOSOMI 2 CROMOSOMI SESSUALI A B 1 4 5 2 3 C 6 7 8 9 10 11 12 D E 13 14 15 16 17 18 F G 19 20 21 22 X Y

NELLE VARIE FASI DEL CICLO CONDENSAZIONE E DECONDENSAZIONE DEI CROMOSOMI NELLE VARIE FASI DEL CICLO Divisione cellulare Replicazione DNA

DIMENSIONI DEI CROMOSOMI Mb METAFASE INTERFASE N. GENI CR 1 250Mb 10m 8.5cm 3000 CR 21 55Mb 2m 1.7cm 400

COLORAZIONE CON BANDEGGIO

BANDE COMPOSIZIONE REPLICAZIONE CROMATINA TRASCRIZIONE SCURE AT TARDI CONDENS INATTIVA CHIARE GC PRESTO ESPANSA (GENI) ATTIVA

DIVERSA RISOLUZIONE DEL BANDEGGIO Risoluzione massima : 1Mb

FISH: ibridizzazione fluorescente in situ

Fluorescence In Situ Hybridisation: FISH

CHROMOSOME PAINTING

TRASLOCAZIONE

FISH Delezione crom 15 nella s.di Prader Willi Permette di visualizzare anomalie cromosomiche di dimensione > 10kb Delezione crom 15 nella s.di Prader Willi

Delezione cromosoma 22q nella SINDROME DI Di GEORGE / VELOCARDIOFACCIALE 5% DI TUTTI I DIFETTI CARDIACI CONGENITI 40% DELLE TETRALOGIE DI FALLOT E ATRESIA POLMONARE 60% DELLE TETRALOGIE DI FALLOT CON ASSENZA DI VALVOLA POLMONARE 5-8% DELLE PALATOSCHISI

T’s Deletions ( ( ( ( ( ( ( ( ( 22q11 ( (3000 KB) ( ( ( ( ( (

FISH Risoluzione: 10kb

Analisi con FISH di cellule in interfase This Aneuploid Screen test shows a female fetus with trisomy-21. The nucleus on the left has been hybridized to probes for chromosomes 13 (green), and 21 (red) and clearly has three red signals. The nucleus on the right has been hybridized to probes for chromosomes 18 (aqua), X (green), and Y (red). Since it has two green signals and no red signal it is female

Interphase nuclei from amniotic fluid cells have been combined with DNA probes for chromosomes 13, 18, 21, X, and Y. The nucleus on the left has been hybridized to probes for chromosomes 13 (green), and 21 (red). The nucleus on the right has been hybridized to probes for chromosomes 18 (aqua), X (green), and Y (red).

Non è necessaria cultura cellulare (colora nuclei in interfase) VANTAGGI DELLA FISH Rapida e sensibile Non è necessaria cultura cellulare (colora nuclei in interfase) Risultati relativamente facili da interpretare. SVANTAGGI DELLA FISH Fornisce informazioni specifiche per la sonda utilizzata. Non permette di vedere altre anomalie