PREPARAZIONE DELLA CURVA STANDARD (BSA) Dosaggio proteico Bio-Rad Protein Assay PREPARAZIONE DELLA CURVA STANDARD (BSA) In triplicato Preparare 6 diluizioni della Proteina Standard (BSA) in un vol. di 800µl di H2O distillata in altrettanti tubi da dosaggio. Aggiungere in ciascun tubo 200µl di reattivo di Biorad. Vortexare le soluzioni e attendere a RT per10 min. Misurare l’assorbanza a λ=595nm. Elaborazione dei dati
PREPARAZIONE DEI CAMPIONI Dosaggio proteico Bio-Rad Protein Assay PREPARAZIONE DEI CAMPIONI 5. Interpolare i valori di assorbanza ottenuti per ciascun campione sperimentale. 6. Calcolare il valore di concentrazione (µg/ml) del campione diluito. 7. Moltiplicare per il fattore di diluizione imposto 8. Calcolare la quantità di proteine totali in Sample Buffer. 9. Calcolare i volumi di caricamento per ciascun campione sperimentale.