ASPETTI EVOLUTIVI 10 plasmidi trovati in 2500 ceppi analizzati (500 specie) omologia di sequenza assente (tranne nei geni A) analogie strutturali dei plasmidi (geni A, B, C e D ed altri elementi: posizione ORI, Inverted Repeats, sequenze ripetute dei loci di stabilità) analogie funzionali
IL PLASMIDE 2m DI S. cerevisiae
IL PLASMIDE pKD1 di K. lactis Funzioni plasmidiche: replicazione ripartizione ricombinazione
IDENTIFICAZIONE DELL’ ORIGINE DI REPLICAZIONE: Vettore integrativo + sequenze del plasmide
FUNZIONE DEI GENI: Inattivazione per inserzione
IDENTIFICAZIONE DEL locus DI STABILITA’: Vettore replicativo + sequenze del plasmide
RICOMBINAZIONE e NUMERO di COPIE pS13 Vector YIp5 (pKA) (pKC) (pKB) Vettore Copie per Cellula cir0 (%) cir+ pS13 18 100 74 pKA 7 79 66 pKB 13 5 59 pKC 15 4 78
Vettori di espressione basati su pKD1: Stabilità Elevato numero di copie