un universo in espansione… A.O.R.N. “GAETANO RUMMO” – BENEVENTO Dipartimento Materno - Infantile Unità Operativa Complessa di Genetica Medica La Genetica Medica: un universo in espansione… Novità diagnostiche Matteo Della Monica 23 ottobre 2010
Classificazione Le malattie genetiche possono essere distinte in: Cromosomiche Numeriche Strutturali Monogeniche Autosomiche Dominanti Recessive X-linked Multifattoriali Mitocondriali
Quante sono le malattie genetiche? Mendeliane Cromosomiche Mitocondriali 16777 3000 (infinite) < 100
Quante sono le sindromi genetiche? Numero elevato e crescente ( POSSUM 5.5 2800 condizioni) Ogni mese “nuove” segnalazioni sulle riviste scientifiche specializzate Distinguiamo: Condizioni ben note (es S. di Down) Condizioni discretamente note (es S.di Williams) Single case report
Citogenetica I Citogenetica classica Cariotipo standard Cariotipo ad alta risoluzione
Il cariotipo standard
Cariotipo ad alta risoluzione
Citogenetica II Citogenetica molecolare FISH FISH multicolor array-CHG Painting / Sonde alfoidi / Sonde locus-specifiche Riarrangiamenti criptici subtelomerici “Telomeri” FISH multicolor SKY e M-FISH M-Band array-CHG
FISH
Indicazioni alla FISH Diagnosi di sindromi da microdelezione Definizione di anomalie complesse Definizione dei punti di rottura di traslocazioni Individuazione di riarrangiamenti criptici subtelomerici Identificazione/caratterizzazione di markers sovrannumerari/cromosomi ad anello
Sindrome di Williams
s. di Williams (LSI ELN – Controllo)
ELN (elastina). Le delezioni che coinvolgono ELN sono responsabili delle anomalie del tessuto connettivo, comprese le anomalie cardiovascolari LIMK1 (lim kinase 1). Espressa nel cervello. Delezioni implicate nelle anomalie della costruzione visuospaziale GTF2I (general transcription factor 2, I). Delezioni potrebbero avere un effetto negativo sul QI STX1A (syntaxin 1A). Coinvolta nel rilascio di neurotrasmettitori e nella secrezione di insulina. Potrebbe avere un ruolo nel diabete BAZ1B (bromodomain adjacent to a leucine zipper 1B). Siccome lega il recettore per la vitamina B si è ipotizzato un ruolo nell’ipercalcemia CYLN2 (cytoplasmic linker 2). Fortemente espresso nel cervello. Si è ipotizzato un suo ruolo nelle anomalie cerebellari GTF2IRD1 (membro della famiglia TF2-I). Coinvolto nelle caratteristiche cranio-facciali NCF1 (neutrophil cytosolic factor 1). Codifica un componente del sistema di ossidazine del NADPH. Delezioni sono associate a diminuzione del rischio di sviluppare ipertensione. E’ deleto nel 40% dei pazienti con WS Da: Meyer-Lindenberg et al (2006) Nature Reviews Neuroscience 7:380–393 (modificata)
Sindrome Velo-Cardio-Faciale
A LSI DiGeorge / VCFS Region LSI ARSA LSI N25 LSI ARSA B
Male 46,XX
FISH PER INFERTILITA’ IN MASCHIO 46,XY
Sindromi diagnosticabili mediante FISH Microdelezioni diagnosticate solo mediante FISH Williams del ( 7) (q11.2q11.2) (elastina) “Velocardiofaciale” del (22) (q11.2q11.2) Microdelezioni diagnosticabili anche mediante FISH Prader-Willi del (15) (q11.2q11.2) Angelman del (15) (q11.2q11.2) Miller-Dieker del (17) (p13.3p13.3) Sotos del ( 5) (5q35) Microdelezioni diagnosticate dalla FISH dopo citogenetica tradizionale Wolf-Hirschhorn del ( 4) (p15) Crid-du-chat del ( 5) (p15) Smith-Magenis del (17) (p11.2p11.2) Microduplicazioni Charcot-Marie-Tooth 1A dup (17) (p11.2p11.2) Pelizaeus-Merzbacher dup ( X) (q22q22)
Riarrangiamenti cromosomici subtelomerici “Telomeri”
Riarrangiamenti criptici subtelomerici
Indicazioni Ritardo mentale medio-grave familiare +/- dismorfismi Quadro sindromico di natura non identificata Quadro sindromico di natura non identificata/RM isolato e poliabortività
FISH MULTICOLOR SKY (Spectral KarYotiping) M-FISH (Multiplex-FISH) utilizza una serie di sonde specifiche con quantità variabile di fluorocromi con spettro di emissione dall’UV all’IR M-FISH (Multiplex-FISH) utilizzando miscela di fluorocromi consente di visualizzare 27 sonde specifiche Sono utili nello studio dei riarrangiamenti cromosomici complessi e della patologia oncologica