La Diagnosi Colture appropriate devono essere sempre ottenute prima di iniziare la terapia antibiotica. Per ottimizzare l'identificazione degli organismi che causano l'infezione, devono essere prelevate almeno due emocolture di cui una per via percutanea ed una prelevata attraverso ciascun catetere vascolare. E’ raccomandato il prelievo prima della terapia antibiotica e secondo quanto richiesto dalla clinica, di colture da altri siti come urina, fluido cerebrospinale, ferite, secrezioni delle vie respiratorie o altri fluidi corporei. La modifica della terapia, da empirica a mirata, è raccomandata appena si ottiene l’isolamento del microrganismo dal sangue o dalla sorgente d’infezione (urina, mat.respiratorio, liquor, ferita, mat.addominale... )

Percorso diagnostico sepsi attuale Mediamente 72-96 ore Paziente “settico” Risultato diagnostico Esecuzione dei prelievi Identificazione ed antibiogramma Invio al laboratorio Crescita su piastra Incubazione Urinocoltura e/o altri materiali positivi Emocoltura positiva Colorazione di Gram Mediamente 48 h prima del risultato diagnostico

Appropriatezza

Emocolture dal 2005 al 2010: Indicatori N° SET % Set POS N° Pz con emo POS % contaminanti * 2005 9117 14,6% 1003 N.R 2006 8691 13,6% 927 2007 9674 13,3% 899 2008 9162 14,4% 971 1,2% 2009 8450 14,9% 936 0,9% 2010 10 mesi 7723 15,3% 872 1,6% * < 3% : standard di accettabilità

Osservatorio microbiologico prevenzione e controllo delle infezioni, in collaborazione con la Direzione Sanitaria e nell’ambito del Comitato Infezioni Ospedaliere mediante : realizzazione di un osservatorio microbiologico monitoraggio della diffusione delle resistenze batteriche segnalazione informatica dell’isolamento di microrganismi ad alta pericolosità  (alert) ai Reparti e al Gruppo Operativo del Servizio di Prevenzione e Sorveglianza Infezioni tipizzazione molecolare dei batteri responsabili di infezione elaborazione delle informazioni archiviate (risultati delle indagini microbiologiche) per monitorare nel tempo la circolazione dei patogeni e dei pattern di antibiotico resistenza ricerca dei portatori o colonizzati di microrganismi di rilevanza epidemiologica mantenimento di ceppo-teca per ricostruire "a posteriori" eventi epidemici e tipizzazione ceppi

2,1% TOT 4605 2,6% 2,8% 3,2% 3,4% 7,5% 45,7% 12,3% 20,2%

Trend % MRSA emocolture Pz/anno

Numero di pazienti con infezioni invasive (sangue e liquor) di Escherichia coli e frequenza di resistenza a fluorchinoloni e cefalosporine di III gen Regione Emilia-Romagna 2005-2008

 RER 2009 ESAMI RESISTENTI INTERMEDI N. % Emocolture 416 129 31,01 0,00

Klebsiella pneumoniae: numero di pazienti con infezioni invasive e frequenza di resistenza a fluorochinoloni e cefalosporine di III gen. (Regione Emilia-Romagna 2005-2008)

RER 2009  ESAMI RESISTENTI INTERMEDI N. % Emocolture 416 65 15,63 10 2,40

METALLO-BETA-LATTAMASI: UN PROBLEMA GLOBALE P. aeruginosa, Acinetobacter, altri GNNF, Enterobacteriaceae VIM-1 a 18 IMP-1 a 23 SPM-1 P. aeruginosa GIM-1 P. aeruginosa AIM-1 P. aeruginosa SIM-1 Acinetobacter KHM-1 Citrobacter freundii 17 17

Emocolture: diagramma di flusso: punti di miglioramento 3 Up-date al software per l’epidemiologia Mediamente 24-48 ore Paziente “settico” Risultato diagnostico 1 pre-analitica modalità prelievo: riduzione contaminanti 7 Identificazione rapida delle beta-lattamasi da colonia con microarray Esecuzione dei prelievi Identificazione ed antibiogramma 6 Ricerca DNA da sangue : casi concordati con il Clinico 2 Maldi-Toff: Identificazione rapida in 15 min di batteri /miceti da emocoltura positiva Invio al laboratorio 4 Postazione incubatore/lettore satellite alle urgenze del Lab Chimico-Clinico: 24 H Crescita su piastra Incubazione Urinocoltura e/o altri materiali positivi 5 Microscopia PNA-FISH Emocoltura positiva Colorazione di Gram Mediamente 48 h prima del risultato diagnostico

Innovazione nel Work-flow identificazione –antibiogramma-epidemiologia VITEK MS VIGIguard Risultati ID VTK MS PC Oppure Laboratory Information System Risultati AST ID/AST Prep station Smart Carrier System Lettura barcode: Campioni Card AST VTK2 Piastrina VTK MS VILINK (Assistenza da remoto) VITEK 2 (V2S v 5.01)