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Fecondazione Artificiale Aspetti medici Parrocchia Santa Maria della Consolazione.

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Presentazione sul tema: "Fecondazione Artificiale Aspetti medici Parrocchia Santa Maria della Consolazione."— Transcript della presentazione:

1 Fecondazione Artificiale Aspetti medici Parrocchia Santa Maria della Consolazione

2 La fecondazione naturale In maniera apparentemente semplice, dall'incontro della cellula sessuale femminile (ovocita) e di quella maschile (spermatozoo) scaturisce una nuova vita. In realtà numerose fasi hanno richiesto giusti tempi di maturazione così come svariati ostacoli sono stati spontaneamente superati prima di giungere all'atto finale della fecondazione.

3 La cellula germinale femminile Le ovaie sono le gonadi femminili che hanno sia una funzione riproduttiva (producono gli ovociti) che endocrina (producono gli ormoni femminili = estrogeni e progesterone). Le ovaie sono le gonadi femminili che hanno sia una funzione riproduttiva (producono gli ovociti) che endocrina (producono gli ormoni femminili = estrogeni e progesterone).

4 La cellula germinale femminile Il ciclo ovarico è controllato da due strutture del sistema nervoso centrale (ipotalamo e ipofisi) tramite la secrezione di ormoni (GnRH, FSH, LH) che agiscono sulle ovaie. Queste sono quindi stimolate a far crescere e maturare un solo ovocita contenuto a sua volta in un follicolo. Il ciclo ovarico è controllato da due strutture del sistema nervoso centrale (ipotalamo e ipofisi) tramite la secrezione di ormoni (GnRH, FSH, LH) che agiscono sulle ovaie. Queste sono quindi stimolate a far crescere e maturare un solo ovocita contenuto a sua volta in un follicolo.

5 La cellula germinale femminile Ecograficamente è possibile in maniera indiretta seguire le fasi maturative dell'ovocita monitorando la crescita del follicolo che può arrivare fino a 25 mm di diametro. In questa prima fase (detta follicolare) l'ovaio produce prevalentemente estrogeni in quantità crescenti. Ecograficamente è possibile in maniera indiretta seguire le fasi maturative dell'ovocita monitorando la crescita del follicolo che può arrivare fino a 25 mm di diametro. In questa prima fase (detta follicolare) l'ovaio produce prevalentemente estrogeni in quantità crescenti.

6 La cellula germinale femminile Un buon livello ormonale permette la giusta crescita e maturazione della mucosa uterina (endometrio), e la secrezione di un muco abbondante, traslucido e filante da parte del collo dell'utero. Intorno al 14° giorno del ciclo ovarico una quantità improvvisamente elevata di LH in circolo determina, dopo ore l'ovulazione, ossia la rottura del follicolo con fuoriuscita del liquido e dell'ovocita.

7 In questa fase l'ovocita misura circa micron di diametro (1 micron = 1 millesimo di millimetro), è circondato da un rivestimento proteico, la zona pellucida, che ha uno spessore di circa 20 micron all'esterno del quale alcuni strati di cellule disposte a raggiera vi aderiscono strettamente (corona radiata). In questa fase l'ovocita misura circa micron di diametro (1 micron = 1 millesimo di millimetro), è circondato da un rivestimento proteico, la zona pellucida, che ha uno spessore di circa 20 micron all'esterno del quale alcuni strati di cellule disposte a raggiera vi aderiscono strettamente (corona radiata).

8 La cellula germinale femminile Nell'ovaio, il follicolo rimasto vuoto si riempie di sangue e si trasforma nel corpo luteo che produce nella seconda fase del ciclo ovarico (detta luteinica) il progesterone. Questo ormone, oltre a causare un fisiologico aumento della temperatura basale della donna, induce sostanziali modificazioni nell'endometrio che lo rendono recettivo all'impianto di un eventuale embrione. Nell'ovaio, il follicolo rimasto vuoto si riempie di sangue e si trasforma nel corpo luteo che produce nella seconda fase del ciclo ovarico (detta luteinica) il progesterone. Questo ormone, oltre a causare un fisiologico aumento della temperatura basale della donna, induce sostanziali modificazioni nell'endometrio che lo rendono recettivo all'impianto di un eventuale embrione.

9 La cellula germinale maschile I testicoli sono le gonadi maschili ed anch'essi hanno una duplice funzione, riproduttiva (producono gli spermatozoi) ed endocrina (testosterone). Sono situati nello scroto, cioè all'esterno dell'addome, perchè necessitano di temperature inferiori a quella corporea. Pur essendo di forma ovalare sono costituiti da numerosi tubuli raggomitolati, i tubuli seminiferi, che hanno un diametro di appena un decimo di millimetro e una lunghezza di circa 2 metri l'uno! Sommandoli tutti si superano i due chilometri! I testicoli sono le gonadi maschili ed anch'essi hanno una duplice funzione, riproduttiva (producono gli spermatozoi) ed endocrina (testosterone). Sono situati nello scroto, cioè all'esterno dell'addome, perchè necessitano di temperature inferiori a quella corporea. Pur essendo di forma ovalare sono costituiti da numerosi tubuli raggomitolati, i tubuli seminiferi, che hanno un diametro di appena un decimo di millimetro e una lunghezza di circa 2 metri l'uno! Sommandoli tutti si superano i due chilometri!

10 La cellula germinale maschile Nello spessore dei tubuli si originano e maturano le cellule germinali maschili (spermatozoi) sostenute e protette da altre cellule altamente specializzate, le cellule del Sertoli. Quando lo spermatozoo è maturo, si distacca dalle cellule del Sertoli, cade nel lume del tubulo seminifero e inizia la sua lunga strada verso l'esterno. Questa fase di differenziazione dura circa 53 giorni. Nello spessore dei tubuli si originano e maturano le cellule germinali maschili (spermatozoi) sostenute e protette da altre cellule altamente specializzate, le cellule del Sertoli. Quando lo spermatozoo è maturo, si distacca dalle cellule del Sertoli, cade nel lume del tubulo seminifero e inizia la sua lunga strada verso l'esterno. Questa fase di differenziazione dura circa 53 giorni.

11 La cellula germinale maschile L'intero processo, detto di spermatogenosi, nell'uomo adulto è di tipo continuo; quindi ogni giorno un certo numero di cellule germinali "dormienti" intraprende tale viaggio in modo che con un apparato riproduttivo normalmente funzionante si producono ogni giorno milioni di spermatozoi. Il gamete maschile maturo è una cellula altamente specializzata e perciò di morfologia insolita. E' lungo circa 60 micron ed è costituito da una piccola testa, contenente condensato, il patrimonio genetico del padre, un collo contenente il "motore" e il "carburante" che fanno muovere vivacemente la lunga coda. L'intero processo, detto di spermatogenosi, nell'uomo adulto è di tipo continuo; quindi ogni giorno un certo numero di cellule germinali "dormienti" intraprende tale viaggio in modo che con un apparato riproduttivo normalmente funzionante si producono ogni giorno milioni di spermatozoi. Il gamete maschile maturo è una cellula altamente specializzata e perciò di morfologia insolita. E' lungo circa 60 micron ed è costituito da una piccola testa, contenente condensato, il patrimonio genetico del padre, un collo contenente il "motore" e il "carburante" che fanno muovere vivacemente la lunga coda.

12 La fecondazione Entrambi i gameti ovocita e spermatozoo giunti a maturazione differiscono da tutte le altre cellule del corpo umano poiché contengono ciascuno solo la metà dei cromosomi tipici per la specie umana (23 invece di 46) (Meiosi). Dalla fusione di due gameti si costituirà quindi un'unica cellula con un patrimonio genetico completo che suddividendosi in maniera corretta darà origine ad un nuovo individuo.

13 Ad entrambi i gameti, però, nonostante la maturità morfologica raggiunta (ovulazione e spermatogenesi) si presentano numerosi ostacoli, anatomo-funzionali da superare prima del fatidico incontro. Ad entrambi i gameti, però, nonostante la maturità morfologica raggiunta (ovulazione e spermatogenesi) si presentano numerosi ostacoli, anatomo-funzionali da superare prima del fatidico incontro.

14 La fecondazione Così gli spermatozoi usciti dal testicolo sono immobili e incapaci di fecondare, ma acquistano la motilità man mano che procedono lungo l'epididimo. Questo è un lunghissimo tubo raggomitolato a ridosso del testicolo, nel sacco scrotale. In esso restano in attesa di essere eiaculati all'esterno con l'atto sessuale. Con l'eiaculazione gli spermatozoi attraversano il canale deferente e poi si mescolano nell'uretra con il liquido della prostata e delle vescichette seminali. In questa fase sono mobili ma non ancora atti alla fertilizzazione dell'uovo. E' questo un processo detto di capacitazione, noto sin dal 1951 ma per alcuni aspetti biochimici ancora oscuro.

15 Lo spermatozoo capacitato ha una motilità iperattiva ed ha subìto la cosiddetta reazione acrosomiale, ossia l'attivazione degli enzimi proteolitici contenuti in un sacchetto che ricopre in parte la testa a mo' di cappuccio (acrosoma). Quest'ultima tappa maturativa lo spermatozoo l'acquisisce risalendo lungo le vie genitali femminili. Lo spermatozoo capacitato ha una motilità iperattiva ed ha subìto la cosiddetta reazione acrosomiale, ossia l'attivazione degli enzimi proteolitici contenuti in un sacchetto che ricopre in parte la testa a mo' di cappuccio (acrosoma). Quest'ultima tappa maturativa lo spermatozoo l'acquisisce risalendo lungo le vie genitali femminili.

16 La fecondazione Infatti, deposti in vagina in decine di milioni nel corso di un rapporto sessuale circa l'1% risale in controcorrente il canale cervicale nel muco ovulare superando il collo e raggiungendo la cavità uterina. L'utero e le tube li aiutano con delle contrazioni ritmiche che hanno un effetto aspirante. Giungono così nella parte terminale della tuba detta ampolla; se il rapporto è avvenuto in periodo ovulare, nell'ampolla troveranno ad aspettarli l'ovocita che, fuoriuscito dall'ovaio con lo scoppio del follicolo, è stato risucchiato dalla tuba. Infatti, deposti in vagina in decine di milioni nel corso di un rapporto sessuale circa l'1% risale in controcorrente il canale cervicale nel muco ovulare superando il collo e raggiungendo la cavità uterina. L'utero e le tube li aiutano con delle contrazioni ritmiche che hanno un effetto aspirante. Giungono così nella parte terminale della tuba detta ampolla; se il rapporto è avvenuto in periodo ovulare, nell'ampolla troveranno ad aspettarli l'ovocita che, fuoriuscito dall'ovaio con lo scoppio del follicolo, è stato risucchiato dalla tuba.

17 La fecondazione Una massa vischiosa di cellule (corona radiata) protegge l'ovocita e numerosi spermatozoi, a fatica, utilizzano vigorosi movimenti e i loro enzimi proteolitici per penetrarla. A ridosso della zona pellucida avviene la reazione acrosomiale, ossia la rottura dell'acrosoma e l'utilizzo massivo degli enzimi sì da procurare un profondo foro nello spessore della ZP. Una massa vischiosa di cellule (corona radiata) protegge l'ovocita e numerosi spermatozoi, a fatica, utilizzano vigorosi movimenti e i loro enzimi proteolitici per penetrarla. A ridosso della zona pellucida avviene la reazione acrosomiale, ossia la rottura dell'acrosoma e l'utilizzo massivo degli enzimi sì da procurare un profondo foro nello spessore della ZP. Penetrato uno spermatozoo, il vincitore della gara, inizia il processo di fusione dei due nuclei, ben visibili nel citoplasma (pronuclei) che, con i 23 cromosomi maschili e i 23 cromosomi femminili, daranno origine ad una nuova cellula con l'intero patrimonio genetico di 46 cromosomi (zigote). La formazione dello zigote richiede circa 20 ore e successivamente, con un ritmo di circa 14 ore, si susseguono le divisioni cellulari. Penetrato uno spermatozoo, il vincitore della gara, inizia il processo di fusione dei due nuclei, ben visibili nel citoplasma (pronuclei) che, con i 23 cromosomi maschili e i 23 cromosomi femminili, daranno origine ad una nuova cellula con l'intero patrimonio genetico di 46 cromosomi (zigote). La formazione dello zigote richiede circa 20 ore e successivamente, con un ritmo di circa 14 ore, si susseguono le divisioni cellulari.

18 La fecondazione Per i primi 2-3 giorni il pre-embrione in divisione è delicatamente trasportato all'interno della tuba nel fluido tubarico grazie a dei movimenti ritmici delle ciglia che tappezzano la stessa tuba. Quando si ritrova in cavità uterina ha già raggiunto uno stadio di sviluppo di 8-16 cellule (morula). Per i primi 2-3 giorni il pre-embrione in divisione è delicatamente trasportato all'interno della tuba nel fluido tubarico grazie a dei movimenti ritmici delle ciglia che tappezzano la stessa tuba. Quando si ritrova in cavità uterina ha già raggiunto uno stadio di sviluppo di 8-16 cellule (morula). FOTO DI EMBRIONE A 8 CELLULE Stadio di sviluppo al 3º giorno dalla fecondazione

19 La fecondazione Il pre-embrione sopravvive molto bene per altri 3 giorni circa nel muco prodotto dall'endometrio maturo. Nel frattempo si suddivide ulteriormente fino allo stadio di blastocisti ed identifica nella cavità uterina un punto adeguato per l'attecchimento. Sbarazzatasi della zona pellucida, la blastocisti si insinua nella mucosa uterina. Il pre-embrione sopravvive molto bene per altri 3 giorni circa nel muco prodotto dall'endometrio maturo. Nel frattempo si suddivide ulteriormente fino allo stadio di blastocisti ed identifica nella cavità uterina un punto adeguato per l'attecchimento. Sbarazzatasi della zona pellucida, la blastocisti si insinua nella mucosa uterina. FOTO DI BLASTOCISTI Stadio di sviluppo al 5º-6º giorno. La freccia indica la massa cellulare interna cioè quellinsieme di cellule che si svilupperà nel futuro embrione.

20 La fecondazione

21 Sterilità Mentre per "infertilità" si intende una condizione in cui non si è più in grado di mettere al mondo figli vivi e capaci di sopravvivere, la "sterilità" è definita come la documentata incapacità a concepire dopo 18 mesi di rapporti sessuali regolari e non protetti. Secondaria è detta la sterilità che sopraggiunge dopo una regolare gravidanza. Mentre per "infertilità" si intende una condizione in cui non si è più in grado di mettere al mondo figli vivi e capaci di sopravvivere, la "sterilità" è definita come la documentata incapacità a concepire dopo 18 mesi di rapporti sessuali regolari e non protetti. Secondaria è detta la sterilità che sopraggiunge dopo una regolare gravidanza.

22 Possibili cause di sterilità La donna presenta una occlusione tubarica e/o aderenze pelviche La donna presenta una occlusione tubarica e/o aderenze pelviche Il marito ha una infertilità medio/severa (bassa conta spermatica o bassa motilità) Il marito ha una infertilità medio/severa (bassa conta spermatica o bassa motilità) Endometriosi severa Endometriosi severa Scarsa qualità ovocitaria Scarsa qualità ovocitaria Fattori tossici ed ambientali Fattori tossici ed ambientali Problematiche sessuologiche Problematiche sessuologiche

23 Tecniche di fecondazione AIH Inseminazione intrauterina AIH Inseminazione intrauterina GIFT Trasferimento dei gameti nelle tube GIFT Trasferimento dei gameti nelle tube FIVET Fecondazione in vitro sia con transfer di embrioni al 3° giorno che allo stadio di blastocisti (5° - 6° giorno) FIVET Fecondazione in vitro sia con transfer di embrioni al 3° giorno che allo stadio di blastocisti (5° - 6° giorno) ICSI Microiniezione ICSI Microiniezione MESA Prelievo epididimale di spermatozoi MESA Prelievo epididimale di spermatozoi TESE Prelievo testicolare di spermatozoi TESE Prelievo testicolare di spermatozoi AHA Assisted Hatching. Apertura della zona pellucida dellembrione per facilitarne limpianto. AHA Assisted Hatching. Apertura della zona pellucida dellembrione per facilitarne limpianto. BE Biopsia Embrionale BE Biopsia Embrionale CONGELAMENTO CONGELAMENTO

24 AIH La donna viene stimolata con delle medicine (gonadotropine) allo scopo di indurre la crescita di più follicoli nelle ovaie, si sottopone a dei prelievi di sangue per il dosaggio ormonale e ad ecografie per seguire lo sviluppo follicolare. LAIH coincide con il momento dellovulazione. La donna viene stimolata con delle medicine (gonadotropine) allo scopo di indurre la crescita di più follicoli nelle ovaie, si sottopone a dei prelievi di sangue per il dosaggio ormonale e ad ecografie per seguire lo sviluppo follicolare. LAIH coincide con il momento dellovulazione. Un campione di seme del partner viene prodotto presso lo studio medico, dopo 2-5 giorni di astinenza dai rapporti. Un campione di seme del partner viene prodotto presso lo studio medico, dopo 2-5 giorni di astinenza dai rapporti. Il campione di seme viene processato in laboratorio allo scopo di selezionare e concentrare gli spermatozoi mobili in un piccolo volume di terreno di coltura specifico. Il campione di seme viene processato in laboratorio allo scopo di selezionare e concentrare gli spermatozoi mobili in un piccolo volume di terreno di coltura specifico.

25 AIH Il seme così preparato viene deposto nello stesso giorno dal ginecologo nellutero utilizzando un catetere molto sottile e morbido. Il seme così preparato viene deposto nello stesso giorno dal ginecologo nellutero utilizzando un catetere molto sottile e morbido.

26 GIFT 3 o 4 ovociti scelti tra quelli aspirati, vengono caricati all'interno di un sottile catetere insieme agli spermatozoi ( circa). Il catetere viene fatto penetrare delicatamente all'interno della tuba per circa 2-3 cm e quindi vengono depositati i gameti.

27 FIVET La donna viene stimolata con delle medicine (gonadotropine) allo scopo di indurre una crescita multipla follicolare. La terapia, per via intramuscolare e sottocutanea, ha una durata di circa 8-12 giorni.

28 FIVET Quando i follicoli della donna sono giudicati maturi si esegue laspirazione ecoguidata di questi follicoli con una sonda vaginale. Laspirazione follicolare comporta quasi sempre il recupero di un alto numero di ovociti maturi ma in piccola percentuale possono anche essere aspirati ovociti a diverso stadio di maturità o anormali.

29 FIVET Le cellule uovo, prelevate dallovaio, vengono poste a contatto con gli spermatozoi nellambito di un contenitore di vetro (= in vitro).

30 ICSI Se gli spermatozoi sono troppo pochi oppure presentano una motilità molto bassa gli ovociti vengono fertilizzati con il metodo ICSI, una tecnica che comporta la microiniezione di un singolo spermatozoo in un ovocita maturo allo scopo di ottenerne la fertilizzazione.

31 AHA Avvenuta la fertilizzazione degli ovociti inseminati gli embrioni che si sviluppano vengono tenuti in incubatore per 2-3 giorni prima di essere trasferiti nellutero della donna. Lo stesso giorno del transfer, e solo in casi selezionati, gli embrioni possono essere sottoposti allapertura della zona pellucida (Assisted Hatching).

32 EMBRIO - TRANSFER Il transfer degli embrioni in utero avviene con un catetere molto sottile e morbido. In questo modo gli embrioni vengono depositati nellutero dove continuano il loro sviluppo fino ad impiantarsi.


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