Test Prenatale Non Invasivo NIPT – PGT2 PGT1 Property of Lamberto Camurri Ph.D. Benvenuti State entrando nel percorso NIPT, test non invasivi di previsione delle più frequenti malattie genetiche

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Numero casi (nati + IVG) Prevalenza anomalie congenite 2,37 % (1:42)2,27 % (1:44) Prevalenza anomalie cromosomiche 0,35 % (1:270)0,32 % (1:312) Alcune anomalie cromosomiche e sindromi genetiche sono causa di nascite di bambini affetti con una frequenza fra 1/900 e 1/10000 nati

Property of Lamberto Camurri Ph.D. La mappa dei 46 cromosomi presenta i tre che causano le principali anomalie cromosomiche compatibili con la sopravvivenza, 13, 18, 21

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Quando a una coppia di cromosomi normalmente presenti se ne aggiunge un terzo, avviene la trisomia, causa degli importanti effetti clinici associati

Property of Lamberto Camurri Ph.D. La trisomia si forma da un errore di maturazione dello spermatozoo

Property of Lamberto Camurri Ph.D. o dell’ovocita

Property of Lamberto Camurri Ph.D. prima della fecondazione

Property of Lamberto Camurri Ph.D. quando i 46 cromosomi di ciascuno di essi YXYX

Property of Lamberto Camurri Ph.D. si riducono a 23, uno per coppia

Property of Lamberto Camurri Ph.D. per dar luogo, unendosi, alla prima cellula fetale di 46 cromosomi

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Se la suddivisione dei cromosomi non avviene correttamente

Property of Lamberto Camurri Ph.D. in una cellula della fecondazione ci sarà un cromosoma in più a causare la trisomia

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Il test sul DNA fetale nel plasma materno

Trisomie 13, 18, 21 Property of Lamberto Camurri Ph.D. può cercare la presenza di trisomie 13, 18 e 21

Trisomie 13, 18, 21 Analisi del cariotipo Con rare anomalie di struttura Property of Lamberto Camurri Ph.D. mentre sul liquido amniotico si studia il cariotipo fetale completo di rare anomalie di struttura

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Il DNA fetale nel sangue materno NON identifica dal 10% al 40% delle anomalie che rivela l’amniocentesi, secondo l’età materna

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Il DNA fetale è presente nel sangue materno a partire dalla 10 settimana e deriva dalla placenta che perde le sue cellule morte nel sangue materno

Property of Lamberto Camurri Ph.D. CGCTAGAAG ATTTCCGCGATCTTCCCGTTCGACTGCAGACCTTCAGCGCGCATATATCGCTAGCATACCGTTATAC GAAGTCGCG  Human Genome  Alignment 2 x 36 bp Fragment Size determination Fragment length Il DNA placentare delle cellule nel sangue è frammentato… …i frammenti vengono sequenziati……

Property of Lamberto Camurri Ph.D. #21 fragments Reference chromosome #21 fragments Test chromosome MaternalcfDNA FetalcfDNA L’analisi dei frammenti di DNA identifica e conta quelli di origine materna…

Property of Lamberto Camurri Ph.D. #21 fragments Reference chromosome #21 fragments Test chromosome MaternalcfDNA FetalcfDNA poi quelli fetali che vengono confrontati coi valori normali di riferimento

Property of Lamberto Camurri Ph.D. #21 fragments Reference chromosome #21 fragments Test chromosome MaternalcfDNA FetalcfDNA per valutare l’eventuale presenza di valori compatibili con una trisomia

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Il test si effettua con almeno il 4% di frazione fetale, in caso contrario si ripete il prelievo senza ulteriori costi ~2% hanno insufficiente frazione fetale <1% nostra rete ambulatoriale Cases900 Successful 1 st tier889 Successful 2nd tier8 Low DNA7 High variance1 Double fail3 Low DNA / FIV ovod.1 High variance / obese2 1/450 ritardi di consegna in laboratorio

Property of Lamberto Camurri Ph.D. La elaborazione matematica indica un risultato di basso rischio compatibile con assenza di trisomia Basso rischio trisomia Compatibile con assenza di trisomia

Property of Lamberto Camurri Ph.D. o di alto rischio compatibile con presenza di trisomia che necessita di consulenza genetica e verifica con tecnica invasiva Alto rischio trisomia Compatibile con presenza di trisomia

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Le performances del test sono paragonabili a quelle del trofoblasto dei villi coriali Trisomy 21 Trisomy 18 Trisomy 13 CVS trophoblastFalse positive rate/specificity0.08%0.06%0.2% cases* False negative Population rate False negative/sensitivity 0.02% 0.74% 0.01% 1.59% NS 0.74% NIPT total False positive rate/specificity0.09%0.13% False negative Population rate False neg. /detection rate 0.08% 0.8% % 3.7% % 9%

Property of Lamberto Camurri Ph.D. con sensibilità e specificità per la trisomia 21 superiori al 99% Trisomy 21 Trisomy 18 Trisomy 13 CVS trophoblastFalse positive rate/specificity0.08%0.06%0.2% cases* False negative Population rate False negative/sensitivity 0.02% 0.74% 0.01% 1.59% NS 0.74% NIPT total False positive rate/specificity0.09%0.13% False negative Population rate False neg. /detection rate 0.08% 0.8% % 3.7% % 9%

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Le performances del test per tris. 13 e 18 sono migliorate se associate a ecografie fra 11 e 20 sett. Trisomy 21 Trisomy 18 Trisomy 13 CVS trophoblastFalse positive rate/specificity0.08%0.06%0.2% cases* False negative Population rate False negative/sensitivity 0.02% 0.74% 0.01% 1.59% NS 0.74% NIPT total False positive rate/specificity0.09%0.13% False negative Population rate False neg. /detection rate 0.08% 0.8% % 3.7% % 9%

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Il test può cercare le anomalie nel numero dei cromosomi X e Y che possono causare sterilità (XXY e X0) e facies caratteristica. Le performances vanno dal 60 al 90% Sex aneuploidyBirth prevalence (with mosaics) X01 in 1,893 girls XXX1 in 947 girls XXY1 in 576 boys XYY1 in 851 boys

Ricerca portatori malattie mendeliane Fibrosi Cistica portatori 1/25 1/2500 Atrofia muscolare spinale 1/50 1/10000 Sordità NS 1/35 3% popol Ritardo mentale FRAXA 1/260 1/1250M 1/2000F Ricerca portatori malattie mendeliane Fibrosi Cistica portatori 1/25 1/2500 Atrofia muscolare spinale 1/50 1/10000 Sordità NS 1/35 3% popol Ritardo mentale FRAXA 1/260 1/1250M 1/2000F Property of Lamberto Camurri Ph.D. Alcune sindromi genetiche possono essere prevenute con lo studio del DNA della gestante che potrebbe essere portatrice sana della malattia

Property of Lamberto Camurri Ph.D. Queste malattie sono molto frequenti, da 1/1250 a 1/10000 nati e, nel caso anche il partner sia portatore, il feto ha 25% di probabilità di essere malato

CVSAMNIO ANATOMY U/S LOW RISK HIGH RISK 31 U/S wit hNT NIPT high risk NIPT increased NT abnormal US low risk NIPT increased NT abnormal US maternal choice Property of Lamberto Camurri Ph.D. Questa presentazione non sostituisce la consulenza specialistica associata alla esecuzione dei test