Dipartimento dei Laboratori - UOS di Microbiologia 18/06/2015 Dal vitro al vivo: l’esperienza dell’ Ospedale pediatrico La diagnostica microbiologica molecolare e l’impatto clinico Paola Bernaschi - Livia Gargiullo IRCCS Ospedale Pediatrico Bambino Gesù di Roma

IL CASO Morgana, 2 mesi 12 gg Ricovero presso altro nosocomio per distress respiratorio Trasferimento in DEA Area Rossa OPBG IOT + VM Inserimento CVC femorale per terapia e NPT Bronchiolite da VRS B

Anamnesi familiare: ndp Anamnesi personale: Nata da TC per pregresso TC, EG 36w + 6 (PN 2,580 Kg). Apgar 7-8. Non ancora effettuate vaccinazioni. Anamnesi patologica remota: Ricovero in 12^ giornata di vita presso OPBG per difficoltà di alimentazione e scarso accrescimento ponderale, dimessa con sospetto di RGE. BACKGROUND

DECORSO CLINICO Graduale miglioramento dinamica respiratoria Estubazione Helmet CPAP  HFNC Rimozione CVC Trasferimento presso reparto Immunoinfettivologia dopo 10gg

Febbre, irritabilità ed inappetenza SEPSI MENINGITE

APPROCCIO DIAGNOSTICO-TERAPEUTICO RACCOMANDATO IN PAZIENTI DI ETÀ PEDIATRICA CON FEBBRE E POSSIBILE EVOLUZIONE IN SEPSI

Antigeni batterici su LIQUOR Es. colturale LIQUOR Emocoltura Indagini virologiche su LIQUOR Es. chimico-fisico LIQUOR Es. chimico-fisico delle urine Urinocoltura Ricerche molecolari su sangue Ricerche molecolari su LIQUOR Indagini virologiche su sangue Esami emato-chimici

GB /mmc, N 73.7%, L 15.6% Hb 8.2 g/dl PLT /mmc Prove di coagulazione nei limiti Funzionalità renale, epatica, elettroliti nella norma PCR 19.4 mg/dl Esame urine nella norma Ecografia transfontanellare nella norma

MENINGITE da HiB Terapia con Ceftriaxone

Liquorcoltura a 24h: negativa PCR su liquor (SeptiFast): campione insufficiente Liquorcoltura a 48h: Enterococcus faecalis PCR su sangue (SeptiFast): Enterococcus faecalis PCR per meningiti su liquor (Eusepscreen): negativa 12-24h 48h MENINGITE da Enterococcus faecalis Emocoltura: negativa

21.4% coltura + PCR 78.6% PCR Meningiti: coltura vs PCR Papavasileiou K. et al., Mol Diag Ther, 2011

SeptiFast

taglio sui “contaminanti” la terapia non interferisce rapidità della risposta bassa quantità di sangue sensibilità del metodo molecolare

E. faecalisH. influenzae b Antigeni battericinon rilevabilePOSITIVO SeptiFast sanguePOSITIVOnon rilevabile Eusepscreen meningite non rilevabilenegativo LiquorcolturaPOSITIVOnegativo CONFRONTO TRA METODICHE

Reazione aspecifica Ag batterici

Nei casi di meningite batterica, lo screening rapido per la ricerca degli antigeni batterici nel liquor non è raccomandato, perché l’affidabilità è controversa

E. faecalis: intrinsecamente resistente alle cefalosporine LINEZOLID, poi de-escalation ad AMPICILLINA DECORSO CLINICO Adeguamento terapia antibiotica Miglioramento condizioni cliniche Monitoraggio eco transfontanellare EEG + PEV/PEU+ RMN encefalo nella norma

il valore del microbiologo importanza del percorso diagnostico per l’outcome del paziente Lotta integrata

Grazie