FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE L’approccio genomico non tiene conto di modificazioni post-traduzionali

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE APPROCCIO PROTEOMICO

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PREFRAZIONAMENTO 1-Estrazione differenziale 2-Frazionamento subcellulare 3-Cromatografia

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PREFRAZIONAMENTO:ESEMPIO 1

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PREFRAZIONAMENTO:ESEMPIO 2

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PREFRAZIONAMENTO:ESEMPIO 3

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PREFRAZIONAMENTO:ESEMPIO

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE ANALISI PROTEOMICA: TECNOLOGIE

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE ELETTROFORESI BIDIMENSIONALE Efficace procedura di preparazione del campione Proteine denaturate e solubili (urea, Detergenti,…) 1° dimensione : Fino a 4 mg di proteine totali per strip Il campione viene comunementepre- adsorbito sulle strip durante la loro reidratazione, permettendo anche alle HMW proteins di entrare nel gel. Questo processo dura almeno 11 ore, dopodichè si può passare alla focalizzazione Durante la corsa elettroforeticala conduttività del gel cambia dipendentemente dal numero di specie cariche, diminuendo mano a mano che le varie specie si focalizzano. 2° dimensione: La transizione dalla prima alla seconda dimensione coinvolge l’equilibrazione della striscia focalizzata in tampone contenente SDS, la deposizione di essa sul gel di corsa e l’inglobamento in un gel di agarosio. COLORAZIONE

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE COLORAZIONE PROTEINE

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE COLLEGAMENTO A BANCHE DATI

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE COLLEGAMENTO A BANCHE DATI COMPARAZIONE CON 2D IN BANCA DATI

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE Detection of protein alterations in male breast cancer using 2D-gel electrophoresis and mass spectrometry.The involvement of several pathways in tmorogenesis K. Chahed et al. Clinica Chimica Acta (2007) ANALISI DIFFERENZIALE N=normale T=tumore

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE Detection of protein alterations in male breast cancer using 2D-gel electrophoresis and mass spectrometry.The involvement of several pathways in tmorogenesis K. Chahed et al. Clinica Chimica Acta (2007) ANALISI DIFFERENZIALE

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE ANALISI DEL GEL

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE IDENTIFICAZIONE DELLO SPOT

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE IDENTIFICAZIONE DELLO SPOT

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE IDENTIFICAZIONE DELLO SPOT

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE

TECNICHE MS E POTENZIALITA’

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PROTEIN MICROARRAY

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PROTEOMICA CON SELDI-TOF SELDI= Surface-Enanched Laser Desorption-Ionization Time-of-Flight Mass-Spectometer

FACOLTA’ DI SCIENZE FF MM NN – CHIMICA ANALITICA CON APPLICAZIONI CLINICHE PROTEOMICA CON SELDI-TOF