Metodi di osservazione dei microrganismi

Presentazione sul tema: "Metodi di osservazione dei microrganismi"— Transcript della presentazione:

1 Metodi di osservazione dei microrganismi

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4 Le dimensioni dei microrganismi
1mm = 0,001mm 1nm = 0,000001mm 1A = 0, mm

5 Limite di risoluzione dell’occhio umano (a 25 cm): 0,2 mm

6 Microscopio elettronico
Microscopio ottico Microscopio elettronico

7 I microscopi ottici microscopi semplici: un solo sistema di lenti (lenti di ingrandimento, i primi microscopi…); microscopi composti: due sistemi di lenti (i microscopi moderni con obiettivi e oculari) Nei microscopi ottici la fonte di illuminazione è una radiazione con lunghezza d’onda relativamente lunga (visibile nm o ultravioletta nei microscopi a fluorescenza). Questo limita il potere di risoluzione che è direttamente proporzionale alla lunghezza d’onda e inversamente proporzionale all’indice di rifrazione e all’apertura numerica dell’obiettivo

8 Anatomia di un microscopio
stativo fonte di illuminazione fotocamera o telecamera oculari diaframma di campo revolver con obiettivi tavolino traslatore vite macrometrica e micrometrica condensatore

9 Ingrandimento

10 La luce visibile

11 Risoluzione e ingrandimento

12 POTERE DI RISOLUZIONE vs INGRANDIMENTO
A=1 nel migliori microscopi

13 Il limite di risoluzione dei microscopi
l: lunghezza d’onda della luce N: indice di rifrazione del mezzo interposto fra lente e preparato a: semiangolo della lente dell’obiettivo = ~0,25mm l: è nm per la luce visibile N: è 1 quando il mezzo interposto fra lente e preparato è l’aria a: nelle lenti migliori si avvicina ad 1

14 Il limite di risoluzione dei microscopi
Il limite di risoluzione può essere migliorato (diminuito): diminuendo l ( nm per la luce UV) aumentando il prodotto Nsena (apertura numerica, NA) per esempio interponendo fra obiettivo e campione un olio con un indice di rifrazione simile a quello del vetro (1,518) = ~0,16mm

15 Microscopio ottico in campo oscuro
Campo chiaro Campo oscuro Treponema pallidum

16 Microscopio ottico a fluorescenza

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18 Microscopio elettronico

19 Gli elettroni si comportano come onde
La lunghezza d’onda degli elettroni è di 0,1-0,04 nm

20 Fonte di elettroni Condensatore Campione Obiettivo Lente del proiettore Fascio di elettroni Immagine sullo schermo fluorescente Immagine sullo schermo televisivo Microscopio elettronico a trasmissione a scansione Deviazione degli Detector

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22 Microscopio elettronico
a trasmissione Microscopio elettronico a scansione

23 Microscopio elettronico