Diagnostica molecolare in Point of Care? Clinical Microbiology and Infection Volume 16, Issue 8, August 2010 L. Bissonnette and M. G. Bergeron Diagnosing.

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1 Diagnostica molecolare in Point of Care? Clinical Microbiology and Infection Volume 16, Issue 8, August 2010 L. Bissonnette and M. G. Bergeron Diagnosing infections––current and anticipated technologies for point-of-care diagnostics and home- based testing O. Clerc and G. Greub Routine use of point-of-care tests: usefulness and application in clinical microbiology S. Loubiere and J.-P. Moatti Economic evaluation of point-of-care diagnostic technologies for infectious diseases R. W. Peeling and D. Mabey Point-of-care tests for diagnosing infections in the developing world Vienna 2010

2 Antigeni urinari S.pneumoniae Plasmodi della Malaria Antigeni urinari L.pneumophila ser.1 C. difficile Tox A&B M. tuberculosis complex da brodocoltura

3 1991 Invasione dell’Iraq Operazione Desert Storm GeneXpert System

4 Facile Smaltimento GeneXpert ® Cartridge Reagenti on board per ogni applicazione Campione e Reagenti sono “intrappolati” nella cartuccia. No Contaminazioni Sistema di Preparazione del Campione Universale Sistema modulare Tutto il test è eseguito in una cartuccia monouso  Preparazione del campione  Amplificazione  Rivelazione Real Time PCR con Molecular Beacon

5 Procedura per il test MTB/RIF Boehme CC et al. N Engl J Med 2010;363:1005-1015

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7 Rapporto ISTISAN 2010 : Infezione da HIV: l’Epidemia“sommersa” (e quindi invisibile…)

8 Il serbatoio di infezione tende ad aumentare leggermente a causa della stabilizzazione delle nuove infezioni e dell’aumento della sopravvivenza Il ritardo diagnostico tende ad aumentare nel corso del tempo La quota di infezioni sommerse è rilevante e può determinare ritardi nell’accesso alla terapia e un aumento del rischio di trasmissione dell’infezione La situazione 2010

9 Diagnosi di infezione da HIV La diagnosi di infezione cronica da HIV 1/2 è definita:La diagnosi di infezione cronica da HIV 1/2 è definita: a. dalla presenza di anticorpi anti HIV 1/2 in associazione ad antigeni virali, b. confermata da metodica in immuno blotting e/o determinazione di acidi nucleici virali, c. con le modalit à previste dal documento di consenso sulle politiche di offerta e le modalit à di esecuzione del test per HIV in Italia (Rep. N. 134/CSR del 27 luglio 2011) (11A11001) (G.U. Serie Generale n. 191 del 18 agosto 2011).

10 Esami di Laboratorio per HIV Screening EIA/CLIA 3°/4°gen HIV-Ab/HIV Ag (p24) II livello Western blot (conferma) III livello Tecniche molecolari (viral load e test di resistenza) (viral load e test di resistenza)Genotipo ( 1-2 e sottotipi) CD4 T Linfociti (monitoraggio/stadiazione)

11 5 priorità: 1. Fare dell’HIV self testing una pratica di routine nelle pratiche assistenziali 2. Implementare nuovi modelli per diagnosticare le infezioni da HIV al di fuori di “medical settings” 3. Prevenire nuove infezioni in collaborazione con persone infette e con i loro partners 4. Perseguire la diminuzione della trasmissione perinatale di HIV 5. Ottimizzare i tempi di profilassi negli incidenti occupazionali Promuovere la Prevevenzione di HIV Nuove Strategie 2009

12 ..for women in labor with undocumented HIV infection immediate maternal HIV status during the current pregnancy, immediate maternal HIV testingusing a rapid HIV antibody test, testing with opt-out consent, using a rapid HIV antibody test, is recommended.

13 positivo Valore predittivo del test positivo www.cdc.gov/hiv/topics/testing/rapid/.htm Test rapidi per Anti HIV

14 OraQuick HIV 1-2 Rapid Antibody Test: designed for oral fluid, serum, semen, whole blood

15 OraQuick Advance allows for the collection of oral fluid specimens by swabbing gums with test device

16 Obtain finger stick blood specimen

17 Loop collects 5 m l of whole blood

18 Insert loop into vial and stir

19 Insert device; test develops in 20 minutes

20 Campionepositivo 2 Bande Controllo 1 Banda Read result

21 Vantaggi dei test rapidi anti HIV Concettualmente semplici e rapidi (10-20’) Tipicamente poco costosi (1-10 $/test) Possibilità di self-testing Risultati individuali immediati Utilizzo di sangue intero o saliva Presenza di controlli interni Ottima sensibilità e specificità

22  La buona notizia : più persone ignare di essere sieropositive si sottopongono al test e ottengono un risultato.  La cattiva notizia: alcune persone otterranno un risultato falso positivo prima del test di conferma. Take home message