Guida allla lettura di un lavoro scientifico. Rivista Scientifica Articolo OriginaleReview Commento/ Lettera.

Presentazione sul tema: "Guida allla lettura di un lavoro scientifico. Rivista Scientifica Articolo OriginaleReview Commento/ Lettera."— Transcript della presentazione:

1 Guida allla lettura di un lavoro scientifico

2 Rivista Scientifica Articolo OriginaleReview Commento/ Lettera

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4 Struttura di un lavoro scientifico originale TITOLO RIASSUNTO (“ABSTRACT) INTRODUZIONE MATERIALI E METODI RISULTATI DISCUSSIONE BIBLIOGRAFIA (REFERENCES)

5 L’esperimento mira a stabilire dei rapporti causali A B C causa effetto meccanismo ESPERIMENTO ? A causa B C effetto ?

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9 Results decreased proliferation but no erk inhibition in LCSC cells Gene profiling reveals increased glycolysis Reduced respiration by sorafenib Increased AMPK phosphorylation Synergistic effect of 2DG and SFB Effect on B16 in vivo; no big difference with 2DG

10 L’INIBITORE MULTICHINASICO SORAFENIB  INIBISCE Raf 1, BRAF wt E BRAF MUTATO  INIBISCE ALCUNI RTK S : VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-   ATTIVITA’ ANTITUMORALE IN: TUMORE DEL COLON, MAMMELLA,CARCINOMA RENALE ED EPATOCARCINOMA

11 SORAFENIB: UN INIBITORE MULTICHINASICO

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13 Modello sperimentale: cellule LCSC-2 (CSC epatiche?) Protocollo di cancerogenesi epatica APA 2AAFPH AFB 1 sacrifice 7 days 11 days different time points Piscaglia, et al. J Hepatol 2009

14 SFB riduce las proliferazione di cellule LCSC-2 ma non l’attivazione di ERK LCSCs-2 DMSO SORAFENIB 5  M / HGF /

15 Analisi microarray DMSOSORAFENIB

16 EFFETTI METABOLICI DEL SFB: INDUZIONE DELLA GLICOLISI GENENOMEFCFUNZIONE SLC2A3 (GLUT3) solute carrier family 2 (trasporto facilitato del glucosio), membro 3 Correlato alla glicolisi aerobia ENO2 enolase 2  2- fosfoglicerato  fosfoenolpiruv ato (glicolisi 7° step) PFKP phosphofructo kinase, platelet fruttosio 6- fosfato  fruttosio 1,6- difosfato (glicolisi 3° step) PDHA1 pyruvate dehydrogenas e (lipoamide) alpha 1 Enzima Mt (piruvato  Acetil CoA)

17 SFB riduce il consumo di ossigeno.... * * ATP INTRACELLULARE

18 ...e la produzione di ATP 0 20 40 60 80 100 120 CTRLSFB 2.5uM 2DG 15mM SFB+2DG NORMALIZED RLU

19 IL SFB FOSFORILA LA CHINASI AMPK P-AMPK actina blot: anti p-AMPK blot: anti actina Dmso SFB 5  M ATP ADP AMP AMP-K METABOLISMO  PROLIFERAZIONE SFB induce fosforilazione di AMP-K in cellule LCSC

20 Sinergismo tra SFB el’inibitore della glicolisi 2- deossi-glucosio (2DG) TOSSICITA’ CELLULARE

21 Effetto di SFB e della combinazione SFB+2DG “in vivo”