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Il caricamento dei tRNA
Le amminoacil-tRNA sintetasi
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il trasferimento dell’a.a. sul tRNA può essere seguito da idrolisi
Il riconoscimento dell’a.a. corretto da parte della a.a.-tRNA sintetasi è verificato con un meccanismo di “correzione di bozze” innescato dal legame con il giusto tRNA: un cambiamento conformazionale può causare l’idrolisi dell’ a.a.- adenilato il trasferimento dell’a.a. sul tRNA può essere seguito da idrolisi Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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La accuratezza del caricamento del tRNAIle da parte della corrispondente sintetasi dipende da un meccanismo di controllo degli errori che agisce in due diverse fasi Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Soppressione
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Mutazioni non-senso possono
essere “soppresse” da un tRNA con una mutazione nell’anticodone che inserisce un a.a. in corrispondenza del codone mutato, producendo così una proteina completa. Nell’esempio la Leu originale è stata sostituita da una Tyr. Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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I soppressori non-senso continuano la lettura attraverso
i codoni di terminazione naturali, sintetizzando proteine che sono più lunghe del normale Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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La soppressione “di senso” avviene quando l’anticodone di un tRNA
è mutato in modo da “rispondere” al codone sbagliato. Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Ricodifica
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Il ribosoma
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PROCARIOTI 70S 50S 30S EUCARIOTI 80S 60S 40S 28S rRNA (4718 nt)
50 proteine 23S rRNA (2904 nt) 5S rRNA (120 nt) 34 proteine 16S rRNA (1541 nt) 21 proteine 18S rRNA (1874 nt) 33 proteine
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Origine del ribosoma rRNA grande rRNA piccolo
Mitocondrio di Tripanosoma Mitocondrio di mammifero Mitocondrio di lievito Cloroplasto di Tabacco Batterio Citosol di Lievito Citosol di Anfibio Citosol di Mammifero rRNA grande rRNA piccolo 597 bp 954 bp 1686 bp 1485 bp 1542 bp 1799 bp 1825 bp 1874 bp 1152 bp 1559 bp 3273 bp 2904 bp 3392 bp 4110 bp 4718 bp
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The ribosome of Escherichia coli at 25 A resolution
as obtained by cryo-electron microscopy of single ribosomes and reconstruction using 4300 projections (Frank et al., Nature 376 (1995) ). Yellow: 30S subunit, blue: 50S subunit.
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Risoluzione della struttura del ribosoma
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Cristalli della subunità 50S di Deinococcus radiodurans
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Le subunità 30S e 50S del ribosoma procariotico
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