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SERVIZIO BIO-PLEX CRIBI. ANALISISIMULTANEEANALISISIMULTANEE DIPROTEINEDIPROTEINE.

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Presentazione sul tema: "SERVIZIO BIO-PLEX CRIBI. ANALISISIMULTANEEANALISISIMULTANEE DIPROTEINEDIPROTEINE."— Transcript della presentazione:

1 SERVIZIO BIO-PLEX CRIBI

2 ANALISISIMULTANEEANALISISIMULTANEE DIPROTEINEDIPROTEINE

3

4 Principio Funzionale

5

6

7 La Camera di Lettura

8 Reporter channelClassify channel MULTIWELLMULTIWELL BIOPLEXBIOPLEX

9 Saggi per Citochine

10 IL-2 IL-4 TNF  GmCSF Sandwich Immunoassay - Cytokine -

11 Kit applicativi Citochine umane (27): IL-2IL-1  IL-4IL-5 IL-6IL-7 IL-8IL-12 (p70) IL-10IL-13 IFN-  IL-17 TNF-  MCP-1 (MCAF) GM-CSFMIP-1  Eotaxin Rantes IL-1ra IL-9 IL-15 PDGF bFGF VEGF Nuovo kit 27-plex: 171-A11127 HUMAN CYTOKINE 27-PLEX, 1X96

12 Kit applicativi Citochine di topo (23): IL-1  IL-1  MIP-1a IL-5IL-3Rantes IL-2IL-6IL-13 IL-10IL-12 (p40)MCP1 IL-4IL-12 (p70)Eotaxin IFN-  IL-17 MIP-1  TNF-  KCIL-9 GM-CSF Nuovo kit 23-plex: 171F11241 MOUSE CYTOKINE 23-PLEX, 1X96

13 Kit applicativi Citochine di Ratto (9): GM-CSFIL-4 IFN-  IL-6 IL-1  IL-10 IL-2TNF-  Kit 9-plex: 171K11070 RAT CYTOKINES 9-PLEX A PANEL,1X96

14 Saggi per Fosfoproteine

15 JNK IBIB ERK1 STAT3 P P P P Sandwich Immunoassay – Phospho -

16 Saggi per Fosfoproteine 15 Phosphoprotein Assays LISATI DI COLTURE CELLULARI LISATI DI CAMPIONI TISSUTALI –Phospho-Erk2 –Phospho-I  B-  –Phospho-JNK –Phospho-p38 MAPK –Phospho-Stat3 –Phospho-ATF2 –Phospho-Erk1 –Phospho-Erk1/2 –Phospho-EGFR –Phospho-Akt –Phospho-GSK-3a/b –Phospho-p70 S6 –Phospho-p90 RSK –Phospho-Stat2 –Phospho-TrkA – Phospho C-Jun – Phospho HSP 27 – Phospho p53 – Phospho NF-kβ – Phospho S6 Ribosomal P.

17 Saggi per Fosfoproteine 8 Total Target Assays –Total Erk2 –Total I  B  –Total p38 MAPK –Total ATF-2 –Total JNK –Total Akt –Total p90 RSK –Total c-Jun

18 All of our cytokine and phosphoprotein detection assays are validated against ELISA and western blot to validate the results. Here we look at the correlation between the Bio-Plex phosphoprotein detection assay and western blot for Erk and Stat-3. Phospho-Erk Western Blot, 8 ug protein/lane Bio-Plex Assay MFI of Bio-Plex +2SD Phospho-Stat3 Western Blot, 8 ug protein/lane Bio-Plex Assay Correlazione tra Bio-Plex e W. Blot

19 Formati Applicabili Un Sistema Aperto

20 Amine Coupling Kit

21 Chimica dell’accoppiamento o C oHoH + = N R H N R H C o Carbodiimide reaction Le beads vengono attivate dall’EDC (1-ethyl-3 (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrocloride) Reagiscono con S-NHS (N-hydroxysuccinimide) Si formano esteri stabili che reagiscono con il gruppo NH 2 della proteina per formare un legame covalente

22 Amine Coupling Kit Amine Coupling Kit Per 30 reazioni di accoppiamento XX COOH Beads Regione XX, 1 ml Per 10 reazioni di accoppiamento Un coupling kit e 3 ml di beads sono sufficienti per 60 multiwell da 96 pozzetti

23 Saggi di Interazione DNA - Proteine

24 Interazione DNA-Proteine


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