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La cinetica enzimatica. Fattori che influenzano la velocità di reazione Temperatura pH Concentrazione dellenzima Concentrazione del substrato Nel caso.

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Presentazione sul tema: "La cinetica enzimatica. Fattori che influenzano la velocità di reazione Temperatura pH Concentrazione dellenzima Concentrazione del substrato Nel caso."— Transcript della presentazione:

1 La cinetica enzimatica

2 Fattori che influenzano la velocità di reazione Temperatura pH Concentrazione dellenzima Concentrazione del substrato Nel caso di enzimi allosterici anche la presenza di modulatori positivi e negativi

3 Temperatura

4 pH

5 [E]

6 [S] Se mettiamo in grafico V in funzione di [S], troviamo che: A bassi valori di [S], la velocità V, aumenta quasi linearmente con laumentare di [S]. Ma come [S] aumenta, gli aumenti di V diventano via via più piccoli (iperbole rettangolare). Lasintoto rappresenta la velocità massima della reazione,V max La concentrazione di substrato che produce una V che è la metà di V max è detta costante di Michaelis-Menten, K m.

7

8 Grafico di Michaelis-Menten

9 Aspetti importanti della cinetica di Michaelis-Menten Lequazione di Michaelis-Menten è la seguente: V max è la velocità limitante per concentrazioni di S tendenti allinfinito K m è la concentrazione di S che fa assumere alla reazione metà della velocità massima ed è espressa in Moli o millimoli o micromoli. Per verificare, poni [S] uguale a K m nellequazione; cancella i termini uguali e ottieni V=V max /2.

10 Calcolo dei parametri cinetici V max e K m Dal grafico di MM non è agevole calcolare la velocità massima della reazione, perché alle alte [S] la curva ha un andamento asintotico. Per questo si usa lelaborazione di Lineweaver-Burk che permette di linearizzare lequazione tramite il calcolo dei doppi reciproci.

11 Grafico di Lineweaver-Burk

12 Significato delle costanti cinetiche Lo studio della cinetica enzimatica è importante per vari motivi: 1)Aiutano a comprendere come lavorano gli enzimi 2)Aiutano a comprendere come lavorano in vivo: le costanti cinetiche Km e Vmax, sono di estrema importanza per capire come gli enzimi si coordinano tra loro a livello metabolico 3)Permettono confronti tra organi e tra specie 4)Possono essere usate a scopo clinico-diagnostico

13 Lossalacetato si forma nel mitocondrio ad opera della malico deidrogenasi (1) e della piruvato carbossilasi (2). Viene consumato dalla citrato sintasi (3) e dalla via gluconeogenetica (4) la aspartato transaminasi (5) trasforma lossalacetato in aspartato (e viceversa). cit aspoxa mal ac-CoA pir Krebs gluconeogenesi

14 Significato di Km nellomeostasi del glucosio [Glucosio] plasma: circa 5mM Glucosio + ATP Glucosio-6-P +ADP Km glucosio per GK epatica=15mM Km glucosio per HK cervello=0,01 mM A parità di concentrazione di ATP (circa 1 mM) come saranno le velocità di GK e HK?

15 Significato Km


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